自己免疫疾患におけるアスパラギンエンドペプチダーゼによる免疫記憶の調節

天冬酰胺内肽酶对自身免疫性疾病免疫记忆的调节

基本信息

批准号：
16043221
负责人：
浅野雅秀
金额：
$ 3.78万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アスパラギンエンドペプチダーゼ(AEP)は、AsnのC末端側で切断するシステインプロテアーゼであり、後期エンドソームからリソソームに局在する。最近、AEPは外来抗原や自己抗原(ミエリン塩基性タンパク質:MBP)のプロセッシングの初期過程を担うことを示唆する報告が相次いだ。しかし、これらの報告はAEP阻害剤を用いたin vitroの実験系であったので、AEP KOマウスを用いて、抗原のプロセッシングと抗原提示並びに免疫寛容の成立と破綻におけるAEPの役割を明らかにすることを本研究の目的とした。本年度は、MBPペプチドを用いた実験的自己免疫性脳脊髄炎(EAE)発症におけるAEPの役割を中心に研究を進めた。EAEはMHC拘束性であるので,まずEAE感受性のSJL系統との交配によりH-2^sをホモに持つEAE感受性のAEP KOマウスを作出した。つぎにAEPの切断点を含むMBP_<89-101>ペプチドを用いて、AEP KOマウスとコントロールマウスでEAEの発症を比較したが、発症率やピークスコア、発症日数に有意な差は認められなかった。MBP_<89-101>ペプチドはcryptic-dominantなエピトープを中央に持つが、両端にはsub-dominantなエピトープを含むことと、カテプシンGの切断点も含んでいたので、現在各々のエピトープだけを持つペプチドでEAE発症を比較している。なお、マウスでは胸腺並びに末梢のB細胞において、AEPとカテプシンGは両方とも発現していることを明らかにした。一方、AEP KOマウスは、加齢と共に脾臓が異常に肥大することがわかった。赤脾随と白脾随の境界や濾胞構造が形成されず、リンパ球の比率が半分以下となり、未成熟な単球系や顆粒球系の細胞が異常に増加していた。抗原提示とどのように繋がるかは不明であるが、ヒトの疾患との関連も模索しながら原因解明を進めている。

天冬酰胺内肽酶（AEP）是一种半胱氨酸蛋白酶，在 Asn 的 C 末端裂解，定位于晚期内涵体至溶酶体。最近，许多报道表明AEP在处理外源抗原和自身抗原（髓磷脂碱性蛋白：MBP）的初始过程中发挥作用。然而，由于这些报道是基于使用AEP抑制剂的体外实验系统，我们将使用AEP KO小鼠来阐明AEP在抗原加工和呈递中的作用，以及免疫耐受的建立和破坏，这就是我们的目的。这项研究。今年，我们利用 MBP 肽重点研究 AEP 在实验性自身免疫性脑脊髓炎 (EAE) 发展中的作用。由于EAE是MHC限制性的，我们首先通过与EAE敏感的SJL品系杂交产生了对于H-2^s纯合的EAE敏感的AEP KO小鼠。接下来，我们使用含有 AEP 断点的 MBP_<89-101> 肽比较了 AEP KO 小鼠和对照小鼠之间的 EAE 发病情况，但在发病率、峰值评分或发病天数方面没有观察到显着差异。开始。 MBP_<89-101>肽在中心具有隐显性表位，但其两端也包含次显性表位以及组织蛋白酶G的切割点，因此目前仅具有使用肽比较EAE发作的每个表位。。此外，我们还发现 AEP 和组织蛋白酶 G 在小鼠胸腺和外周 B 细胞中表达。另一方面，AEP KO小鼠的脾脏随着年龄的增长而异常增大。红、白脾细胞和滤泡结构边界未形成，淋巴细胞比例不足一半，未成熟单核细胞和粒细胞异常增多。尽管尚不清楚这与抗原呈递有何关系，但我们目前正在努力阐明其原因，同时寻找与人类疾病的联系。