ガラクトース転移酵素遺伝子ノックアウトマウスを用いた糖鎖機能の解析

使用半乳糖基转移酶基因敲除小鼠分析聚糖功能

基本信息

批准号：
12033202
负责人：
浅野雅秀
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12033202/
关键词：
ガラクトース転移酵素ノックアウトマウス胎生致死胎盤形成

项目摘要

交雑系(129/Sv x C57BL/6)のGalT-I KOマウスは,予想に反して発生過程に問題はなく正常に発生した。そこでGalT-I欠損の影響を更に解析するために,近交系のマウスに8世代戻し交配したGalT-I KOマウスを作製した,すると驚いたことに,C57BL/6背景のKOマウスは出生時に100%死亡し,BALB/c背景のKOマウスは胎生後期に致死となることが明らかとなった。BALB/c背景のKO胎仔の死亡時期を明らかにするために,胎仔を経時的に取り出して解析したところ,胎生14.5日から16.5日の間に死亡することが明らかとなった。胎仔と胎盤の重量を測定して同腹のコントロールと比較したところ,KO胎仔は胎生14.5日では若干小さく,その後成長が止まって16.5日までに死亡した。それに対して胎盤は胎生12.5日ですでに小さい傾向が見られ,14.5日では有意に発達が遅延していた。胎盤の組織切片を解析したところ,母体と胎仔を繋ぐ海綿状栄養膜層が薄く,胎仔側の迷宮層の血管形成が不全で,血流が著しく減少していた。胎仔組織の解析がまだ終了していないが,胎盤の所見からBALB/c背景のGalT-I KOマウスは胎盤の発達に異常があるために,胎生後期に致死となることが示唆された。C57BL/6背景の胎仔は胎生17.5日から有意に成長の遅延が認められ,出生時の体重がコントロールの70%しかなく,未熟児の状態で出生することがわかった。新生児を調べると肺胞が全く膨らまずに死亡していたので,直接の死因は未熟児で出生するために肺呼吸に移行できないことであると考えられた。しかし出生前の胎盤を調べてみると程度は軽いもののBALB/c背景のGalT-I KOマウスと同じ異常が認められたので,このマウスも胎盤の発達異常が胎仔の成長遅延の原因と考えられた。以上の結果,GalT-Iが合成する糖鎖は胎盤の成長に必須であり,その機能はマウスの遺伝的背景により非常に強く影響を受けることが明らかとなった。

与期望相反，来自混合系统的Galt-I KO小鼠（129/SV X C57BL/6）在发育过程中没有影响，并且成功地开发了。为了进一步分析Galt-i缺乏症的影响，我们用近杂交小鼠准备了8代回染的Galt-i KO小鼠，令我们惊讶的是，据透露，C57BL/6背景的KO小鼠在出生时100％死亡，而Balb/c Background的KO小鼠在后期的Lethal Lethal中成为Lethal的Lethal。为了澄清BALB/C背景中KO胎儿死亡的时机，随着时间的流逝，胎儿被清除并进行了分析，并揭示了它们死于胚胎生命的14.5至16.5天。测量了胎儿和胎盘的重量，并将其与垃圾对照组进行了比较，胎儿在胚胎寿命的14.5天时稍小，然后生长停止并死亡16.5天。相比之下，胎盘在胚胎寿命的12.5天时已经很小，并且在14.5天时发育明显延迟。对胎盘的组织切片的分析表明，连接母亲和胎儿的海绵体层很薄，胎儿侧迷路层的血管生成不足，导致血液流量显着降低。尽管胎儿组织的分析尚未完成，但胎盘的发现表明，由于胎盘的发育异常，具有BALB/C背景的Galt-I KO小鼠在胚胎阶段是致命的。 C57BL/6背景胎儿显示出从胚胎出生的17.5天开始生长的显着延迟，在早产状态下，只有70％的对照体重的体重。在检查新生儿时，肺泡已经死亡，根本没有肿胀，人们认为死亡原因是由于早产婴儿的诞生而无法过渡到肺部呼吸。然而，在检查产前胎盘时，尽管在温和的程度上，发现与具有BALB/C背景的Galt-I KO小鼠的异常相同，并且人们认为胎盘的异常发育是胎儿生长延迟的原因。结果，已经揭示了Galt-I合成的聚糖对于胎盘生长至关重要，并且其功能受小鼠遗传背景的高度影响。