膵β細胞GABA分泌特性の細胞生理学的研究

胰腺β细胞GABA分泌特性的细胞生理研究

基本信息

批准号：
08877006
负责人：
八尾寛
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.マウス膵臓ランゲルハンス島からβ細胞をRorsman & Trube(1986)の方法で単離した。これを小脳培養細胞の細胞体を接触させ、両者にパッチクランプ法を適用した。β細胞に脱分極パルスを与えることにより、Ca^<2+>電流を観察したにも関わらず、小脳培養細胞に GABA誘発電流を認めなかった。2.同様の実験をニスタチン穿孔パッチ法を用いて行ったが、脱分極やグルコース刺激にを与えたときのβ細胞からのGABAの遊離を認めなかった。3.ラット膵臓ランゲルハンス島をサンプリングチューブに集め、遊離されるGABAをHPLC法により定量した。細胞内総GABA量の2.5-6%が浮遊液中に放出された。4.グルコース刺激によるGABA遊離の上昇は認められなかった。5.以上により、グルコース刺激や脱分極により、GABAが放出されない可能性が考えられる。GABAの分泌は他のメカニズムにより制御されていかも知れない。他の可能性として、グルコースや脱分極により分泌されるGABAは、自発的に遊離されるものに比べわずかであることが考えられる。測定精度を上げることにより、以上の可能性を明らかにしていく必要がある。また、GABAの遊離とインシュリンの分泌を比較する必要がある。6.膵α細胞由来の株細胞のαTC6は、GABA_A受容体を発現していることが報告さている(Gaskins et al.1995)。これを単離β細胞と共培養し、密着した細胞どうしから記録することにより、GABAの分泌を捉えることを計画している。

1。通过Rorsman＆Trube（1986）的方法，从Langerhans的小鼠胰岛中分离出β细胞。这是通过接触小脑培养细胞的细胞体来完成的，并将贴片夹在两者中。尽管通过将去极化脉冲施加到β细胞中观察到Ca^<2+>电流，但在小脑培养的细胞中未观察到GABA诱导的电流。 2。使用Nistatin穿孔贴剂法进行了类似的实验，但是当进行去极化或葡萄糖刺激时，未观察到GABA从β细胞中释放。 3。在采样管中收集了兰格汉的大鼠胰岛胰岛，并通过HPLC定量释放的GABA。总体内GABA含量的2.5-6％被释放到悬架中。 4。未观察到葡萄糖刺激升高的GABA释放。 5。以上表明葡萄糖刺激和去极化可能不会释放GABA。 GABA的分泌可能受其他机制调节。另一种可能性是，与自发释放的GABA相比，用葡萄糖或去极化分泌的GABA很小。通过提高测量精度，需要澄清上述可能性。还必须将GABA的释放与胰岛素的分泌进行比较。 6。据报道，源自胰腺α细胞的细胞系表示GABA_A受体（Gaskins等，1995）。该公司计划通过将其与孤立的β细胞共同培养，并密切接触细胞记录它来捕获GABA的分泌。