シナプス前終末におけるCaチャネルと伝達物質放出の連関に関する研究

Ca通道与突触前末梢递质释放关系的研究

基本信息

批准号：
03225211
负责人：
八尾寛
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.シナプス前終末のカルシウムチャネルの多様性鶏胚毛様体神経節に存在する杯状巨大シナプス前終末に対し、パッチ電極法を適用することにより、カルシウム電流を記録した。動眼神経の断端にロ-ダミン標識デキストランを投与することにより、順行性にシナプス前終末を同定した。シナプス後細胞から同時記録を行うことにより、シナプス前終末のカルシウム電流にともない、シナプス後細胞からシナプス電流を記録した。このことから、正しくシナプス前終末から記録されていることを確認した。Na電流、K電流抑制下に、Ba電流を測定することにより、シナプス前終末のカルシウムチャネルの多様性を検討した。シナプス前終末に存在する高閾値型カルシウムチャネルは、ジヒドロピリジン誘導体に感受性を示さなかった。また、その90%以上がωーコノトキシンにより阻害された。このことから、N型カルシウムチャネルがシナプス前終末の主要なカルシウムチャネルであり、L型カルシウムチャネルは、ほとんど存在しないことが明らかになった。また、ωーコノトキシンおよびジヒドロピリジン誘導体に抵抗性を示すBa電流は、膜電位感受性においてN型カルシウムチャネルと異なる性質を示した。以上により、シナプス前終末には、2種類のカルシウムチャネルサブタイプが共存していることが明らかになった。2.伝達物質放出に連関するカルシウムチャネルサブタイプの同定ωーコノトキシンによりシナプス伝達が強く抑制されることから、N型カルシウムチャネルが、伝達物質の放出と連関している活性帯のカルシウムチャネルであることが示唆される。しかし、僅かではあるが、ωーコノトキシン抵抗性のシナプス伝達が認められることから、ωーコノトキシン抵抗性のカルシウムチャネルも伝達物質の放出に連関していると考えられる。

1.突触前末梢钙通道的多样性通过应用贴片电极法记录鸡胚睫状神经节中存在的杯状巨型突触前末梢的钙电流。通过向动眼神经残端施用罗丹明标记的葡聚糖，顺行识别突触前末梢。通过同时记录突触后细胞，记录了突触后细胞的突触电流以及突触前末端的钙电流。由此，确认了从突触前端子正确地进行了记录。我们通过测量 Ba 电流同时抑制 Na 和 K 电流来研究突触前末梢钙通道的多样性。突触前末梢中存在的高阈值钙通道对二氢吡啶衍生物不敏感。而且90%以上被ω-芋螺毒素抑制。这些结果表明，N型钙通道是突触前末梢的主要钙通道，而L型钙通道几乎不存在。此外，对ω-芋螺毒素和二氢吡啶衍生物具有抗性的Ba电流表现出与N型钙通道不同的膜电位敏感性。上述结果表明两种钙通道亚型在突触前末梢中共存。 2.与递质释放相关的钙通道亚型的鉴定由于ω-芋螺毒素强烈抑制突触传递，因此建议N型钙通道是与递质释放相关的活性区钙通道。然而，由于观察到少量的抗ω-芋螺毒素突触传递，因此认为抗ω-芋螺毒素钙通道也参与递质释放。