シナプス伝達機序に対するATPのフィードバック修飾の細胞生理学的解析

ATP反馈修饰对突触传递机制的细胞生理分析

基本信息

批准号：
05680720
负责人：
八尾寛
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.孵卵14-15日のニワトリ胚を断頭し、動眼神経と毛様体神経節を同定した。蛍光Ca^<2+>指示薬のFura-2を結合したdextran(fura-dextran)を動眼神経の断端に投与することにより、杯状シナプス前終末を選択的に標識した。1個のシナプス前終末から、活動電位各々に応答する細胞内Ca^<2+>濃度の変化が捉えられた。シナプス前終末のCa^<2+>濃度は、静止状態で20-60nM(n=10)、単一活動電位により、10-20nM上昇した。2.ATPは、興奮性シナプス電流(EPSC)を抑制すると同時に活動電位に伴うシナプス前終末のCa^<2+>上昇を著明に抑制した。これらのATPの作用は、アデノシンA1受容体特異的な阻害薬の8-cyclopentyltheophylline(CPT、1μM)により拮抗された。また、アデノシンにより、EPSCおよびシナプス前終末のCa^<2+>上昇が抑制され、CPTにより拮抗された。以上により、ATPは速やかにアデノシンに分解され、アデノシンA1受容体を活性化することにより、シナプス前終末のCa^<2+>上昇が抑制され、その結果、伝達物質の放出が抑制されることが分かった。3.杯状シナプスには、ω-コノトキシン感受性と抵抗性の2種類のCa^<2+>チャネルサブタイプが存在している。アデノシンは、ω-コノトキシン感受性のCa^<2+>流入を抑制するのに対し、ω-コノトキシン抵抗性のCa^<2+>流入を抑制しない。すなわち、ω-コノトキシン感受性のCa^<2+>チャネルが、アデノシンにより選沢的に修飾されることが示された。アデノシンの作用の大部分がCa^<2+>チャネルの抑制により説明される。4.アデノシンがω-コノトキシン感受性のCa^<2+>チャネルを特異的に抑制することから、アデノシン受容体とこのCa^<2+>チャネルが近接していることが考えられる。他の可能性として、ω-コノトキシン抵抗性のCa^<2+>チャネルには、A1受容体の情報伝達系と反応するような分子ドメインが存在しないことが考えられる。

1。在第14-15天孵化的鸡肉胚胎，并鉴定出动眼神经和纤毛神经节。小龙虾前末端通过施用与眼科神经的树桩结合的右旋糖（Fura-二克）选择性标记。从一个突触前末端捕获了细胞内Ca^<2+>浓度的变化。突触前末端的Ca^<2+>由于单个动作电位，在静息状态下增加了20-60 nm（n = 10）和10-20 nm。 2。ATP抑制了兴奋性突触电流（EPSC），并显着抑制了与动作电位相关的突触前末端的CA^<2+>。这些ATP的作用是通过腺苷A1受体特异性抑制剂8-细胞易感的茶碱（CPT，1μM）拮抗的。腺苷还抑制了EPSC和突触前末端的Ca^<2+>升高，并被CPT拮抗。结果，发现ATP迅速降解为腺苷，通过激活腺苷A1受体，抑制了突触前末端处的Ca^<2+>的增加，因此，释放发射机的释放被抑制。 3。杯状突触中存在两个Ca^<2+>通道亚型：ω-持续毒素敏感和抗性。腺苷抑制对ω-持续毒素敏感的Ca^<2+>涌入，而ω-抗毒素耐药的Ca^<2+>涌入，不会抑制持续的持续性Ca^<2+>涌入。也就是说，表明对腺苷选择性修饰ω-偶联毒素敏感的Ca^<2+>通道。腺苷的大部分作用都通过抑制Ca^<2+>通道来解释。 4。由于腺苷特异性抑制了对ω-偶联毒素敏感的Ca^<2+>通道，因此人们认为腺苷受体和该Ca^<2+>通道近距离接近。另一种可能性是持续使用的CA^<2+>通道没有任何与A1受体信号系统反应的分子结构域。