遺伝子改変動物を用いた生体開口放出計測システムの構築

利用转基因动物构建生物胞吐作用测量系统

基本信息

批准号：
17659061
负责人：
八尾寛
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度までの研究を発展させ、synaptopHluorinの遺伝子をThy1.2遺伝子プロモーター制御下に発現するマウス(Araki et al. 2005)を用いて、海馬の単一の苔状線維終末における開口放出のダイナミクスとその可塑性を解析した。この結果、以下の新しい事実を見出した:(1)プロテインキナーゼC(PKC)により、開口放出が促進されること、(2)この促進が放出可能な小胞数の増加と小胞の開口放出確率の両方の増加によること、(3)どちらのメカニズムが優位に用いられるかにより、タイプ1,2,3の3種類の応答に分類されること、(4)タイプ3の応答には、開口放出能を持たない終末が可塑的に開口放出を獲得するものが含まれること、(5)どのタイプに属するかはシナプス前終末ごとに異なること。本研究の成果については、日本神経科学大会(京都、2006年7月)、Fifth East Asian Biophysics Symposium ＆ Forty-Fourth Annual Meeting of the Biophysical Society of Japan(沖縄、2006年11月)、日本生理学会大会(大阪、2007年3月)などにおいて報告した。すなわち、遺伝子改変動物を用いた生体開口放出システムにより、単一シナプス前終末を共焦点顕微鏡下に同定しながら、今までにない高い精度で開口放出ダイナミクスを解析できることが示された。よって、本研究の当初の主要な目的が果たされた。しかし、さらにS/N比の向上をはかる必要性があり、このためには、開口放出光学プローブの改良や測定システムの改良をふくむ本研究の発展的継続が必要であることが明らかになった。

研究直到去年一直开发，以分析在海马中使用在Thy1.2基因启动子控制下表达突触氟蛋白基因的小鼠在海马中的单苔纤维末端的动力学及其可塑性（Araki等人，2005年）。结果，我们发现了以下新事实：（1）蛋白激酶C（PKC）促进开放释放，（2）由于可以释放的囊泡数量增加以及囊泡开放释放的可能性的增加，（3）它归类为三种响应，依赖于三种类型的效果，而不是构成型号，而不是限制了该机构，而不是该机构，而不是该机构，而不是对4的效果。释放打开塑料，（5）哪种类型与一个突触前末端不同于另一种类型。这项研究的结果在日本神经科学会议（京都，2006年7月），日本生物物理学会的第五次东亚生物物理学研讨会和第四十四年度会议上（2006年11月，2006年11月）和日本生理学学会（Osaka，2007年3月）。换句话说，已经表明，使用转基因物质的生物释放系统可以以前所未有的精度来分析开放式动力学的释放动力学，同时识别共聚焦显微镜下的单突前末端。因此，实现了这项研究的最初主要目标。但是，有必要进一步提高S/N比率，并且已经揭示了这项研究需要继续开发和继续进行，包括改进光圈发射光学探测和测量系统。