短期シナプス可塑性の細胞内機序の解析

短期突触可塑性的细胞内机制分析

基本信息

批准号：
04267211
负责人：
八尾寛
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

実験材料として,孵化14日の鶏胚毛様神経節の摘出標本を用いた。1.シナプス前終末の細胞内カルシウムの測定毛様体神経節の節前線維の動眼神経の断端に,カルシウム感受性蛍光色素のFura-dextranを投与した。Fura-dextranは軸索輸送によりシナプす前終末に運ばれ、是を標識する。1-3個のシナプス前終末から340mmと380mmの2波長蛍光測光法により、細胞内カルシウム濃度を測定した。動眼神経の電気刺激に応答して、シナプス前終末のカルシウムの増加が認められた。細胞外のカルシウムを除去するかカドミウムを投与することにより、カルシウム増加が消失することから。活動電位依存性のカルシウム変動は、シナプス前終末が績分極することにより、電位依存性のカルシウムチャネルが活性化されることよるカルシウムの終末内への流入によりひき起こされることがわかった。2.シナプス前終末カルシウム流入のアデノシンによる抑制活動電位依存性のカルシウム上昇は、10-100mmのアデノシンにより可逆的に抑制された。この抑制の程度は20-30個であるが、アデノシンのシナプス伝達抑制作用の殆んどは、このカルシウム上昇の抑制により説明された。アデノシンの作用は、アデノシンA1受容体の特異的阻害菜の8-cyclopenty ltheojhyline(CPT)/mmあるいは、8-phenyltheophylline(8-PT)10mmにより抵抗されたことから、アデノシンA1受容体を介した作用であると説明された。3.W-コノトキシン感受性カルシウムの抑制N型カルシウムチャネルの特異的阻害素のW-コノトキシンにより、活動電位依存性カルシウム上昇の約80%が抑制された。しかし、W-コノトキシン抵抗性のカルシウム上昇は、アデノシンによる抑制を受けなかった。N型カルシウムチャネルがアデノシンにより特異的に抑制される。

以孵化第14天鸡胚睫状神经节切除标本作为实验材料。 1.突触前末梢细胞内钙的测量将呋喃葡聚糖（一种钙敏感荧光染料）施用于睫状神经节的节前纤维的动眼神经残端。呋喃葡聚糖通过轴突运输被运输至突触前末端并标记该分子。通过双波长荧光光度法在 340 mm 和 380 mm 处从 1-3 个突触前末端测量细胞内钙浓度。为了响应动眼神经的电刺激，观察到突触前末梢钙的增加。这是因为通过去除细胞外钙或施用镉，钙的增加会消失。研究发现，动作电位依赖性钙波动是由于突触前末梢极化激活电压门控钙通道而导致钙流入末梢引起的。 2.腺苷对突触前终末钙流入的抑制动作电位依赖性钙升高被10-100mm的腺苷可逆地抑制。尽管这种抑制程度为20-30，但腺苷的大部分突触传递抑制作用可以通过抑制钙升高来解释。腺苷的作用受到腺苷 A1 受体特异性抑制剂 8-环戊基茶碱 (CPT)/mm 或 8-苯基茶碱 (8-PT) 10 mm 的抵抗，表明该作用是由腺苷 A1 受体介导的。解释说。 3.抑制W-芋螺毒素敏感的钙 W-芋螺毒素是N型钙通道的特异性抑制剂，可抑制大约80%的动作电位依赖性钙升高。然而，腺苷不能抑制W-芋螺毒素抗性钙升高。 N 型钙通道被腺苷特异性抑制。