乳児白血病における11q23転座に関連する遺伝子の単離とその解析

婴儿白血病11q23易位相关基因的分离与分析

基本信息

批准号：
08457220
负责人：
林泰秀
金额：
$ 4.35万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

乳児白血病の約70%にMLL遺伝子の再構成がみられ、この遺伝子が発症と進展に重要な役割を有する。我々はこれまでt(5;6;11)-乳児白血病の切断点のクローニングより6q27座位するAF6遺伝子と、5q12に座位するAF-5α遺伝子を単離し、これらの遺伝子の性状を検討してきた。この3年間に我々は、t(11;16)(q23;p13)、t(11;22)(q23;q13)およびt(10;11)(p12;q23)のMLL遺伝子の相手遺伝子の単離を行い、その性状を検討した。近年t(8;16)(p12;p13)―白血病の16p13より、CBP遺伝子が単離された。我々はこのCBP遺伝子がt(11;16)に関連する遺伝子である可能性を考え、CBPとその相同性の高い、p300cDNAをプローブにしてサザンブロッティングとノーザンブロッティングを行ったところ、正常とサイズの異なるバンドがみられた。MLLとCBP、p300遺伝子のプライマーを設定し、RT-PCR法を行ったところ、MLL-CBPおよびMLL-p300のキメラcDNAが検出でき、16p13の相手がCBP遺伝子、22q13の相手がp300遺伝子であることを明らかにした。またt(10;11)の10p12よりcDNAライブラリーをスクリーニングし、ABI-1遺伝子を単離した。これらの遺伝子の種々の組織での発現をみると、CBPとp300遺伝子はほとんどの組織で発現がみられた。さらに現在保有しているt(5;11),t(11;17)等の白血病細胞を用いてcDNAライブラリーを作り、相手遺伝子の単離を行い、種々の組織での発現等、その産物の性状の詳細な検討を通じて、造血組織の発生・分化におけるこれらの遺伝子の役割と乳児白血病発症における役割を解明している。

在大约 70% 的婴儿白血病中观察到 MLL 基因重排，该基因在疾病的发生和进展中发挥着重要作用。我们通过克隆t(5;6;11)-婴儿白血病断点分离了位于6q27位点的AF6基因和位于5q12位点的AF-5α基因，并研究了这些基因的特性。在过去的三年里，我们已经确定了 MLL 基因 t(11;16)(q23;p13)、t(11;22)(q23;q13) 和 t(10;11)(p12;q23) 的伙伴基因) 的性质进行了研究。最近，从t(8;16)(p12;p13)——白血病16p13中分离出CBP基因。我们认为这个CBP基因可能是与t(11;16)相关的基因，并使用与CBP高度同源的p300 cDNA作为探针进行Southern和Northern印迹，看到了不同的条带。当我们为MLL、CBP和p300基因设置引物并进行RT-PCR时，检测到MLL-CBP和MLL-p300的嵌合cDNA，表明16p13的伴侣是CBP基因，22q13的伴侣是p300基因。透露说。我们还从t(10;11)的10p12中筛选了cDNA文库并分离了ABI-1基因。通过观察这些基因在不同组织中的表达情况，我们发现CBP和p300基因在大多数组织中都有表达。此外，我们将利用现有的t(5;11)和t(11;17)等白血病细胞创建cDNA文库，分离相关基因，并通过详细检查分析其产物，例如在各种组织中的表达。通过研究这些基因的特性，我们正在阐明这些基因在造血组织发育和分化以及婴儿白血病发展中的作用。