MLL遺伝子の特性及び転座相手遺伝子との融合遺伝子による白血病発症機構の解析

MLL基因及易位伴侣基因融合基因特征分析白血病发病机制

• 批准号: 09770838
• 负责人: 城 達郎
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770838/
• 关键词: MLL; 11q23転座; 二次性白血病; Hox; LTG9; AF6; LTG19; 白血病; 染色体転座

1. MLLキメラタンパクの細胞内局在の検討平成9年度はMLL遺伝子の転座相手遺伝子のうち,核に局在するLTG9遺伝子と細胞質に局在するAF6遺伝子とを用いて,MLL-LTG9及びMLL-AR6キメラ遺伝子を発現させることにより,MLLキメラタンパクは転座相手遺伝子産物の性質に関わらず,核に局在することを明らかにした.また,その核局在性には全ての転座に共通するMLLのN端側領域が重要であることをも明らかにして報告した(Joh et al.,Oncogene 15,1681-1687,1997).2. MLL上及びMLLキメラタンパクの機能解析平成10年度はMLL遺伝子の標的遺伝子解明のため,まず,マウス由来の32Dc13細胞を用いて,MLL-LTG9及びMLLのN端側領域(MLL-Zf(-))遺伝子の誘導発現系を作製した.MLL遺伝子ノックアウトマウスの解析において,脊椎骨でHox遺伝子群の発現異常が報告されている.そこで,今回作製した誘導発現系を用いて,Hox遺伝子群の発現について検討した.MLL-LTG9及びMLL-Zf(-)遺伝子を発現誘導すると,Hox a7,Hox b7,Hox c9遺伝子の発現低下が認められた(Joh et al.,Oncogene 18,1125-1130,1999).Hox遺伝子には体節形成のみならず,血液細胞の発生・分化を制御する働きもあることから,MLLキメラタンパクが細胞核内に局在し,正常MLLタンパクの機能をdominant negativeに抑制することによりHox遺伝子群の発現異常をもたらし,その結果,血液細胞の正常な発生・分化が妨げられ,白血病化に働いている可能性が考えられる.更に,この誘導発現系を用いて,RAP-PCR Differential Display法により,いくつかのMLL遺伝子の標的遺伝子候補を得ており,現在解析中である.

1. 1997年，我们利用表达AR6基因的易位伙伴基因中位于细胞核的LTG9基因和位于细胞质的AF6基因研究了MLL嵌合蛋白的亚细胞定位。嵌合基因我们发现，无论易位伴侣基因产物的性质如何，MLL嵌合蛋白都定位在细胞核中。核定位还取决于MLL的N末端，这是所有易位所共有的。侧面区域很重要（约翰等人，Oncogene 15, 1681-1687, 1997).2。 MLL和MLL嵌合蛋白的功能分析1998年，我们首先利用小鼠来源的32Dc13细胞阐明了MLL基因的靶基因（MLL基因诱导表达系统）。在基因敲除小鼠的分析中，已经报道了Hox基因组在椎骨中的异常表达，因此，我们使用我们创建的诱导表达系统研究了Hox基因组的表达。 (-)基因被诱导表达，Hox观察到 a7、Hox b7 和 Hox c9 基因的表达降低（Joh 等人，Oncogene 18, 1125-1130, 1999）。Hox 基因不仅控制体节形成，还控制血细胞的发育和分化。 MLL嵌合蛋白定位于细胞核，具有正常MLL蛋白的主导功能。负抑制导致Hox基因组异常表达，可能阻碍血细胞的正常发育和分化，导致白血病。此外，利用这种诱导表达系统，利用RAP-PCR差异显示方法，我们获得了多个靶点MLL 基因的候选基因，目前正在分析中。

项目成果

Tatsuroh Joh: "Expression of CD8β and alteration of cell surface phenotype in adult T-cell leukaemia cells." British Journal of Haematology. 98. 151-156 (1997)

Tatsuroh Joh：“成人 T 细胞白血病细胞中 CD8β 的表达和细胞表面表型的改变。”英国血液学杂志 98. 151-156 (1997)

Tatsuroh JOH et al.: "Establishment of an inducible expression system of chimeric MLL-LTG9 protein and inhibition of Hox a7,Hox b7 and Hox c9 expression by MLL-LTG9 in 32Dc13 cells." Onccogene. 18・4. 1125-1130 (1999)

Tatsuroh JOH 等人：“嵌合 MLL-LTG9 蛋白诱导表达系统的建立以及 MLL-LTG9 在 32Dc13 细胞中抑制 Hox a7、Hox b7 和 Hox c9 的表达。” 1999）

Yoshitaka Hosokawa: "A small deletion at the 3'-untranslated region of Cyclic D1/Prad1/Bc11 oncogene in a patient with chronic lymphocytic leukemia." International Journal of Cancer. (in press).

Yoshitaka Hosokawa：“慢性淋巴细胞白血病患者循环 D1/Prad1/Bc11 癌基因 3-非翻译区的小缺失。”

Tatsuroh JOH et al.: "Expression of CD8β and alteration of cell surface phenotype in adult T-cell leukaemia cells." British Journal of Haematology. 98・1. 151-156 (1997)

Tatsuroh JOH 等人：“成人 T 细胞白血病细胞中 CD8β 的表达和细胞表面表型的改变。”英国血液学杂志 98·1（1997）。

Tatsuroh Joh: "Chimeric MLL products with a Ras binding cytoplasmic protein AF6 involved in t (6;11) (q27;q23) leukemia localize in the nucleus." Oncogene. 15. 1681-1687 (1997)

Tatsuroh Joh：“具有 Ras 结合细胞质蛋白 AF6 的嵌合 MLL 产物参与 t (6;11) (q27;q23) 白血病定位于细胞核。”