小児悪性腫瘍の国際共同研究

小儿恶性肿瘤国际合作研究

基本信息

批准号：
12218208
负责人：
林泰秀
金额：
$ 2.75万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

本邦の小児悪性固形腫瘍でDFF45、p19^<ARF>、INI-1/SNF5遺伝子の解析を行った。1番短腕(1p)36より単離したBACを用いて30MbのBACコンティグを作成し、高濃度STS Mapを用いたPCR法を用いてホモ欠失のある神経芽腫の細胞株をみいだした。この欠失領域は480kbにおよび、ショットガン法を用いてこの領域をシークエンスして、6つの既知の遺伝子と1つの未知の遺伝子、3つの未知のESTおよび2つのmicrosatelite markerをみいだした。今年度はこの中から、アポトーシスに関与するDFF45遺伝子を検討した。DFF45遺伝子は、神経芽腫21細胞株のPCR-SSCP法による検討では変異はみられなかったが、種々のサイズの転写産物がみられ、これらは正常の副腎と末梢血ではみられなかった。神経芽腫の原因遺伝子であるか否かは、さらに今後の検討を要する。p19^<ARF>遺伝子は本邦と米国の神経芽腫細胞株17株中2株(12%)と本邦の新鮮腫瘍31例中5例(16%)に発現の異常を認めた。Ewing肉腫と横紋筋肉腫では細胞株と新鮮腫瘍のいずれも神経芽腫よりも高頻度に発現の異常がみられ、予後とも相関していた。INL-1/SNF5遺伝子の異常を、本邦と米国のrhabdoid腫瘍6例を含む種々の小児固形腫瘍111例で解析した。Rhabdoid腫瘍の細胞株6株と新鮮腫瘍6例すべてにこの遺伝子の部分または全欠失を、それ以外の小児固形腫瘍では、細胞株34株中2株に全欠失がみられたが、新鮮腫瘍ではみられなかった。今回の結果により、DFF45は神経芽腫の、p19^<ARF>はEwing肉腫と横紋筋肉種の、INI-1/SNF5はrhabdoid腫瘍の発症に関与することが示唆された。本邦以外の症例での検討は今後の課題である。

日本在日本的恶性实体瘤中分析DFF45，p19^<ARF>和INI-1/SNF5基因。使用从第一短臂（1p）36分离出的BAC创建30MB BAC污染物，并使用高浓度的STS图使用PCR方法，以看到具有均骨骼神经性的神经发芽瘤细胞库存。丢失的区域是480 kb，使用shot弹枪法的序列，发现了六个已知基因，一个未知基因，三个未知的EST和两个微磷灰石标记。今年，我们检查了与凋亡有关的DFF45基因。 DFF45基因在神经母细胞瘤21细胞的PCR-SSCP方法中没有变化，但在正常肾上腺和外周血中未发现。未来是否需要神经创造的致病基因。 P19^<ARF>基因在日本和美国的17个菌株中有2个（12％）的表达异常，日本有31种新鲜肿瘤中的5个。与神经母细胞瘤相比，尤因肉瘤和水平肌瘤都异常表达表达，并且与预后相关。在111例儿童形肿瘤的患者中，分析了INL-1/SNF5异常，包括日本和美国的六种色鹿肿瘤。所有六个细胞的横纹肌肿瘤和六个新鲜肿瘤都丧失了所有这些基因部分或所有损失，在其他儿科实体瘤中，34个细胞中有2个完全丢失，但在肿瘤中没有发现。结果，DFF45建议DFF45参与神经性系，P19^<ARF>，EWING肉瘤和水平肌肉以及色胸肿瘤发作的INI-1/SNF5。在日本以外的其他情况下，考虑因素是未来的问题。