遺伝子治療をめざしたアデノウイルス発現ベクターの開発

用于基因治疗的腺病毒表达载体的开发

基本信息

批准号：
05454329
负责人：
斎藤泉
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (B)
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05454329/
关键词：
アデノウイルスベクター遺伝子治療プロモーター

项目摘要

アデノウイルスベクターは遺伝子治療や基礎医学研究での利用が急速に進んでいる。我々は組換えアデノウイルスの作製法の画期的高率化に既に成功している。本研究では、このベクター系で使うべき強力な転写プロモーターとして、SRα、EF1α、CAG各プロモーターからLacZ遺伝子を発現する組換えアデノウイルスを作製した。これらを用いて13種類の倍養細胞で発現の高さを比較したところ、全ての細胞株でCAGプロモーターの活性が最大であることが分かった。特に免疫系、神経系、肝細胞株などの分化した細胞株における発現量でCAGプロモーターの発現が高いことが分かった。このことから、アデノウイルスベクターに用いる発現プロモーターとしては、CAGプロモーターが最も優れていることが結論された。CAGプロモーターの分化した細胞での高い発現能は従来知られていなかったため、この結果は、アデノウイルスベクターに限らず広く細胞の分化機能を研究するあらゆる分野における発現研究にきわめて有力な手段を提供することになった。また、アデノウイルスベクターによる遺伝子治療については、炎症などの副反応が将来の重要な問題となる可能性があるが、このように極めて発現の高いプロモーターを登載したベクターを用いれば、投与量を最小にすることができるため、CAGプロモーターを持ったアデノウイルスベクターは将来このベクターの主流となる可能性が高いと思われる。

腺病毒载体用于遗传治疗和基础医学研究。我们已经成功地取得了重组腺病毒的开创性速度。在这项研究中，从SRα，EF1α和CAG启动子表达LACZ基因的重组腺病毒是该载体系统中使用的强大转移启动子。使用这些，将表达高度与13种类型的培养细胞进行比较，发现所有细胞都是最大的CAG启动子活性。特别是，发现在分化细胞中CAG启动子的表达，例如免疫系统，神经系统，肝细胞应变等，在CAG启动子中高度表达。这得出的结论是，CAG启动子是用于腺病毒载体的最佳表达启动子。由于过去未知CAG启动子在细胞中的表达非常昂贵，因此该结果在所有研究细胞分化功能的所有领域都提供了一种非常有影响力的表达方法，而不仅仅是腺病毒载体。关于腺病毒载体的基因处理，诸如炎症之类的副反应可能是一个重要的问题，但是如果您使用具有高度表达启动子的载体，则最小剂量很小。将来成为该向量的主流。