がんに対する新規免疫遺伝子治療の開発研究

新型癌症免疫基因疗法的研发

基本信息

批准号：
12F02773
负责人：
安川正貴
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2012
资助国家：
日本
起止时间：
2012-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

がんに対する新たな免疫療法を開発する目的で下記の研究を遂行し成果が得られた。WT1特異的T細胞レセプター遺伝子（TCR）導入による遺伝子改変T細胞（WT1-TCR-T細胞）を用いた難治性白血病と骨髄異形成症候群に対する新規細胞免疫療法の開発：我々のグループが樹立したWT1特異的HLA-A24拘束性細胞傷害性T細胞（CTL）クローンからTCR遺伝子を単離し、その発現ベクターを構築した。タカラバイオ株式会社との共同研究によって、内在性TCR発現を抑制し、WT1特異的TCRを選択的に発現できるベクターを開発し、本研究ではこの発現ベクターを使用した。様々な実験を遂行し、下記の結果が得られた。１）WT1-TCR-T細胞は、元のCTLクローン同様、白血病細胞株ならびに患者から分離した白血病細胞をHLA-A24拘束性に直接認識し傷害した。２）ヒト白血病細胞移植ヒト化マウスの実験系を用いて検討したところ、WT1-TCR-T細胞を養子免疫することによって、ヒト白血病細胞の増殖を抑制した。さらに、ヒト化マウス継代実験によって、ヒト白血病幹細胞を排除できる可能性が示唆された。３）WT1-TCR-CD4陽性T細胞は、WT1特異的HLA-A24拘束性に、HLA class II分子を介して白血病細胞を直接認識し、Th1タイプのサイトカインを産生した。４）WT1-TCR-CD4陽性T細胞は、WT1-TCR-CD8陽性CTLの細胞傷害性を増強させ、白血病細胞へのトラフィッキングを誘導した。５）WT1-TCRをヒト造血幹細胞に遺伝子導入し、HLA-A24トランスジェニック免疫不全NSGマウスに移植した。その結果、WT1特異的HLA-A24拘束性CTLが、マウス体内で分化増殖することが示された。

进行了以下研究以开发新的癌症免疫疗法并取得了结果。 WT1特异性T细胞受体基因（TCR）引入了遗传改良的T细胞（WT1-TCR-T细胞），并开发新细胞对骨髓样综合征的免疫疗法：由我们组建立的WT1。 HLA-A24受约束的细胞Carnol T细胞（CTL）克隆构建其表达载体。与Takara Beio Co.，Ltd。的联合研究开发了一种抑制内部TCR表达并可以选择性表达WT1特异性TCR的向量，该研究使用了该表达矢量。进行了各种实验，并获得了以下结果。 1）像原始CTL克隆一样，WT1-TCR-T细胞被白血病细胞和与患者分离的白血病细胞的HLA-A24约束直接识别。 2）在检查人类白血病细胞移植人文化小鼠的实验系统时，通过采用WT1-TCR-T细胞抑制人白血病细胞的增殖。此外，人性化小鼠的继承实验表明可以消除人白血病干细胞。 3）WT1-TCR-CD4阳性T细胞通过WT1特异性HLA-A24约束中的HLA II类分子直接识别白血病细胞，产生Th1型细胞因子。 4）WT1-TCR-CD4阳性T细胞已增强了WT1-TCR-CD8阳性CTL的细胞损伤，并引起了白血病细胞的诱导流量。 5）将WT1-TCR引入人类造血干细胞，并移植到HLA-A24转基因免疫缺陷NSG小鼠中。结果，证明WT1特异性HLA-A24约束CTL在小鼠中有区别。