白血病に対する新たな免疫遺伝子療法の開発

开发针对白血病的新型免疫基因疗法

基本信息

批准号：
13218094
负责人：
安川正貴
金额：
$ 26.05万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

白血病に対する新たな免疫遺伝子療法の開発を目的として研究を遂行し、以下の成果を得た。1)骨髄腫細胞はリンパ腫細胞と比べて、WT1特異的細胞傷害性T細胞(CTL)によるパーフォリン依存性細胞傷害感受性が高いことが明らかとなった。2)CD4陽性およびCD8陽性CTLにおけるパーフォリン発現と細胞周期との関連を調べたところ、CD8陽性CTLでは細胞周期に関わらず恒常的に発現が認められたが、CD4陽性CTLではG2/M期に転写が促進することが明らかとなった。この違いは、STAT5のパーフォリンプロモーターへの結合の差によることが判明した。3)腫瘍細胞に強い細胞傷害性を示すWT1特異的CD8陽性CTLクローンからT細胞レセプターα鎖およびβ鎖遺伝子をクローニングし、正常CD4陽性およびCD8陽性T細胞に遺伝子導入することによって、白血病細胞に対してHLAクラスI拘束性に細胞傷害性が獲得されることが明らかとなった。ただし、CD4陽性T細胞による機能発現には標的細胞上のHLAクラスIIとCD4分子との結合が必要であることも明らかとなった。4)HLA-DP5拘束性CD4陽性T細胞が認識する新たなWT1エピトープを同定した。このペプチド特異的CD4陽性T細胞はWT1特異的に白血病細胞を殺傷した。5)これまでの基礎研究成果をもとに、WT1とhTERT由来ペプチドを用いたがんペプチドワクチンの第I相臨床試験を遂行している。グレード2以上の有害事象は認められず、一部の症例に臨床効果が得られている。6)新たな免疫不全マウスにヒト造血幹細胞を移植することによってヒト免疫系を構築したマウスを作製した。今後、ヒトにおけるワクチン開発に有用であると思われる。

进行该研究的目的是开发针对白血病的新免疫基因疗法，并获得以下结果：1）发现，WT1特异性细胞毒性T细胞（CTLS）比淋巴瘤细胞更容易受到穿孔蛋白依赖性细胞毒性的影响。 2）当我们研究CD4阳性和CD8阳性CTL中的孔蛋白表达与细胞周期之间的关联时，我们发现CD8阳性的CTL由组成型表达，而与细胞周期无关，但是发现CD4阳性阳性的CTL在G2/M期间促进转录。发现这种差异是由于STAT5与穿孔蛋白启动子的结合差异所致。 3）据透露，通过从WT1特异性CD8阳性CTL克隆中克隆T细胞受体α-和β-链基因的HLA I限制的细胞毒性，从而在肿瘤细胞中表现出强细胞毒性，并将基因转移到正常的CD4-CD8-POSSISTIVE CD8-POSSISTIS CD8-POSSISTID TT中，从而实现了T细胞受体α-和β-链的基因。然而，也已经表明，CD4阳性T细胞的功能表达需要HLA II类和CD4分子在靶细胞上的结合。 4）我们确定了由HLA-DP5限制的CD4阳性T细胞识别的新的WT1表位。该肽特异性的CD4阳性T细胞特别杀死了白血病细胞。 5）根据先前的基础研究的结果，我们使用WT1和HTERT衍生的肽进行了I期临床试验。尚未观察到2年级或更高的不良事件，并且在某些情况下已经实现了临床益处。 6）制备小鼠，其中通过将人造血干细胞移植到新的免疫缺陷小鼠中来构建人类免疫系统。据信这对于将来的人类开发疫苗很有用。