ストレス蛋白-癌抗原融合分子による抗腫瘍効果

应激蛋白-癌抗原融合分子的抗肿瘤作用

• 批准号: 12217113
• 负责人: 鵜殿 平一郎
• 金额: $ 3.26万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12217113/
• 关键词: ストレス蛋白; がん抗原ペプチド; hsc70; CTL; ワクチン

我々はCTL認識抗原ペプチドを遺伝子工学的にストレス蛋白分子hsc70と融合させた融合分子がワクチンとして確実な効果があることを証明し、その細胞性免疫誘導機構及びストレス蛋白分子のどのような性状にそれが依拠するのかを明らかにした。腫瘍抗原ペプチドpRL1a(マウス白血病細胞RL♂1のLd拘束性ペプチド)、TRP2(マウスメラノーマB16のKb拘束性ペプチド)、さらにモデル抗原としてOVA257-264をそれぞれhsc70のC末に融合してその免疫効果を検討した。これら3つのペプチドに対して強力なCTLが誘導された。これらのCTLはオリジナルの腫瘍に対しても高い傷害活性を示した。CTLエピトープの融合部位はhsc70のN末、C末どちらでもよかった。in vivoへの投与経路は皮下、皮内ではなく静脈内投与が最も効果的であった。このことはhsc70のターゲットとする抗原提示細胞は皮下ランゲルハンス細胞ではないことを意味している。むしろ、脾臓内未熟樹状細胞、或いはマクロファージの可能性が高い。hsc70融合分子によるCTL誘導にはCD4^+T細胞は必須ではなかった。また、免疫の際にカラゲナンを投与するとhsc70融合分子によるCTL誘導は全く消失するためカラゲナン感受性の抗原提示細胞がhsc70融合分子のプロセッシングにあたると推測された。次にhsc70のどの領域がCTL誘導に必須であるかを検討するためにhsc70のdeletion mutantsとCTIエピトープの融合分子を作製した。その結果hsc70280-385の間に必須領域があると判断した。hsc70はある細胞表面受容体をもつ特定の抗原提示細胞に特異的に取り込まれると考えられている。この受容体の特定と同時にhsc70280-385と受容体の結合を介して細胞内に取り込まれる可能性を今後検討する。

我们已经证明，CTL识别抗原肽与应激蛋白分子hsc70基因融合的融合分子作为疫苗绝对有效，并且我们已经研究了细胞免疫诱导机制和应激蛋白分子的特性。这取决于。将肿瘤抗原肽 pRL1a（小鼠白血病细胞 RL♂1 的 Ld 限制肽）、TRP2（小鼠黑色素瘤 B16 的 Kb 限制肽）和作为模型抗原的 OVA257-264 融合到我们考虑过。针对这三种肽诱导了有效的 CTL。这些 CTL 还表现出针对原始肿瘤的高细胞毒活性。 CTL表位的融合位点可以是hsc70的N端或C端。最有效的体内给药途径是静脉内给药而不是皮下或皮内给药。这意味着hsc70靶向的抗原呈递细胞不是皮下朗格汉斯细胞。相反，它可能是脾脏或巨噬细胞中未成熟的树突状细胞。 CD4+T细胞对于hsc70融合分子的CTL诱导不是必需的。此外，当在免疫期间施用角叉菜胶时，由hsc70融合分子诱导的CTL被完全消除，这表明角叉菜胶敏感的抗原呈递细胞负责加工hsc70融合分子。接下来，为了研究 hsc70 的哪个区域对于 CTL 诱导至关重要，我们创建了 hsc70 缺失突变体和 CTI 表位的融合分子。结果，确定在hsc70280-385之间存在必需区域。据认为，hsc70 被具有某些细胞表面受体的特定抗原呈递细胞特异性摄取。在鉴定该受体的同时，我们将研究hsc70280-385通过与该受体结合而被摄入细胞的可能性。

项目成果

Ishikawa H. et al.: "Hsc70 genetically fused with a helper-epitope conferred a reduced CT Lactivity, resulting in a failure to keep hosts away from tumor growth in vivo."Cell Stress & Chaperones. 5. 387-387 (2000)

Ishikawa H.等人：“Hsc70与辅助表位基因融合，降低了CT L活性，导致无法阻止宿主体内肿瘤生长。”细胞应激

Udono H. et al.: "Introduction of PA28a lacking C-terminal residues act as dominant-negative form and reveals a novel function of hsp90 in MHC I antigen processing"Cell Stress & Chaperones. 5. 381-381 (2000)

Udono H. 等人：“引入缺乏 C 末端残基的 PA28a 作为显性失活形式，揭示了 hsp90 在 MHC I 抗原加工中的新功能”细胞应激