Development of antigeni modificaiton system to enhance effect of cancer vaccine

开发抗原修饰系统以增强癌症疫苗的效果

基本信息

批准号：
21H03825
负责人：
望月慎一
金额：
$ 11.4万
依托单位：
The University of Kitakyushu
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

がんワクチンは生体が自ら持つ免疫機能を活性化してがん細胞を攻撃する治療法であるが、使用されている抗原が自身由来ということもあり、その抗原性は決して高いわけではない。本研究では、がん細胞に特異的に認識される多糖を利用し、がん細胞の抗原性改変に基づく有効ながんワクチンの開発を試みる。2022年度にヒアルロン酸（HA）と抗原タンパク質のオボアルブミン（OVA）との縮合反応によりコンジュゲート体を作製し、HAの分子量の異なるもの、HAとOVAの組成が異なるコンジュゲート体を得た。CD44との結合能を水晶発振子を用いて蛍光修飾した各コンジュゲート体のがん細胞への取り込みを評価したところ、高密度なコンジュゲート体がCD44に対し非常に強い親和性を示し、細胞にもよく取り込まれた。免疫応答を評価したところ、OVA特異的CTLを含む脾細胞とコンジュゲート体処理したがん細胞を混合させたところ、培養上清中に非常に高濃度のインターフェロンガンマを検出した。これは、がん細胞がHAを介してOVAを取り込み、その一部を抗原として提示していることを示している。これより、本研究の基本概念となる外来抗原を人為的に送達させることで細胞の抗原性が変化することを証明された。また、抗原としてタンパク質ではなく、ペプチドを用いてもコンジュゲート体の作製を試みた。ヒアルロン酸のカルボキシル基にN- (6-Maleimidocaproyloxy) succinimide (EMCS)を導入し、システインを付加させた抗原ペプチドとの反応を試みた。NMRによりペプチドの量を定量したところ、HA１本あたり約8個のペプチドが結合したコンジュゲート体を得ることに成功した。

癌症疫苗是一种激活活体免疫功能并攻击癌细胞的治疗方法。在这项研究中，我们将尝试使用癌细胞专门识别的多糖基于癌细胞的抗原修饰来开发有效的癌症疫苗。在2022财年，通过透明质酸（HA）和抗原蛋白oboalbumin（OVA）之间的受控反应产生了共轭体，并且具有不同HA和OVA组成的结合体不同。当将每个结合体的掺入是一种与CD44的荧光模式的结合，已评估到每个结合体的癌细胞时，高密度的偶联物体对CD44和细胞表现出非常强的亲和力经常被带进去。评估免疫反应时，将含有OVA特异性CTL的脾细胞和用结合物处理的癌细胞混合。这表明癌细胞通过HA进入OVA，并提供其中一些作为抗原。这证明，人为地提供门诊抗原（这是这项研究的基本概念）改变了细胞抗原特性。此外，即使您使用肽而不是蛋白质作为抗原，我们也试图产生共轭体。将N-（6-甲米型胶质）琥珀酰亚胺（EMC）引入透明质酸的羧基，我们试图与添加半胱氨酸的抗原肽反应。当通过NMR量化肽的量时，它成功地获得了每公顷约八个肽的结合体。