低分子量G蛋白質Rhoの活性化機構と作用機構

低分子量G蛋白Rho的激活机制及作用机制

基本信息

批准号：
07770103
负责人：
佐々木卓也
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、Rho低分子量G蛋白質の活性化機構、機能および作用機構について検討した。私共を含めたいくつかのグループによって、Rhoが、アクチン細胞骨格の制御を介して、種々の細胞機能を制御していることを見い出している。本年度の研究において、まず、RhoをADPリボシル化して不活性化するC3を用いて、Rhoの新しい細胞機能についてさらに検討した。その結果、MDCK細胞において、細胞外Ca^<2+>濃度の上昇によって細胞間接着(adherens junctionおよびtight junctionの形成)が誘起されるが、RhoはそのマーカーであるE-カドヘリンのadherens junctionへの局在、および、ZO-1のtight junctionへの局在に関与していることが明らかとなった。一方、細胞膜上でアクチン細胞骨格の再構成を制御する蛋白質系としてERMファミリー(Ezrin,Radixin,Moesin)-CD44系が知られているが、私共は、すでに、Rhoが細胞内でERMと共に局在していることを明らかにしている。しかし、RhoがERMの機能を制御しているか否かについては不明であった。そこで、本年度の研究において、C3をマイクロインジェクションしたMDCK細胞において、ERMの局在を検討したところ、RhoはERMの細胞辺縁領域への局在を制御していることが明らかとなり、RhoがERMを介してアクチン細胞骨格を制御していることが強く示唆された。今後は、Rhoのこの機能に関与する標的蛋白質を単離し、それがどのような機構でERM-CD44系を介してアクチン細胞骨格の再編成を制御しているのかを明らかにする予定である。以上の結果を得たことにより、本年度の本研究の研究計画はほぼ達成できたと考えている。

本研究对Rho低分子G蛋白的激活机制、功能及作用机制进行了研究。包括我们在内的几个研究小组已经发现 Rho 通过调节肌动蛋白细胞骨架来控制各种细胞功能。在今年的研究中，我们首先使用 C3 研究了 Rho 的新细胞功能，C3 通过 ADP 核糖基化使 Rho 失活。结果表明，在MDCK细胞中，细胞外Ca 2+ 浓度的增加诱导细胞间粘附(粘附连接和紧密连接的形成)，并且Rho作用于粘附连接处的标记物E-钙粘蛋白。 ZO-1参与ZO-1的定位和ZO-1的紧密连接。另一方面，ERM家族（Ezrin、Radixin、Moesin）-CD44系统被认为是控制细胞膜上肌动蛋白细胞骨架重组的蛋白质系统，其存在已明确。然而，目前尚不清楚 Rho 是否控制 ERM 功能。因此，在今年的研究中，我们研究了显微注射C3的MDCK细胞中ERM的定位，发现Rho控制ERM向细胞外周区域的定位，强烈表明肌动蛋白细胞骨架是通过肌动蛋白细胞骨架进行调节的。未来，我们计划分离出参与Rho这一功能的靶蛋白，并阐明它们通过ERM-CD44系统控制肌动蛋白细胞骨架重组的机制。通过取得以上成果，我们相信我们已经基本实现了今年的研究计划。