rho p21 GTP結合蛋白質による細胞骨格の制御機構とその病態

rho p21 GTP 结合蛋白的细胞骨架控制机制及其病理学

基本信息

  • 批准号:
    05770097
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.7万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
  • 财政年份:
    1993
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1993 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

本研究では、Rho低分子量G蛋白質の機能と活性化機構について検討した。増殖因子を細胞に作用させると、アクトミオシン系を介して細胞膜のラッフリングや細胞運動が誘起される。RhoからのGDPの解離を抑制することによりRhoの活性化を阻害するRho GDIをKB細胞へマイクロインジェクションしたところ、インスリンやHGFにより誘起される細胞膜のラッフリングが阻害された。インスリンにより誘起されるラッフリングの阻害はGTPgammaS-Rac(RacはRhoに類似した低分子量G蛋白質)により、HGFにより誘起されるラッフリングの阻害はGTPgammaS-Rhoによりそれぞれ回復した。また、Rho GDIをケラチノサイト308R細胞へマイクロインジェクションしたところ、HGFにより誘起される細胞運動が阻害された。この阻害はGTPgammaS-Rhoにより回復した。-方、私共はRhoに作用する活性制御蛋白質としてGDP解離促進蛋白質(Smg GDS)とGDP解離抑制蛋白質(Rho GDI)を見出してその性状を解析している。最近、Dblがん遺伝子産物がRhoに類似したCdc42のGDSとして作用することが報告されている。本年度は、DblがRhoのGDSとして作用するか否かを検討した。大腸菌で発現して精製したDblはRhoファミリーに属するRho、Rac,Cdc42のGDP/GTP交換反応を促進した。私共のこれまでの解析から、Smg GDSは翻訳後修飾を受けているRhoにのみ作用することが明らかとなっていたが、Dblも翻訳後修飾を受けているRhoに対してより高い活性を示した。さらに、DblはSmg GDSの場合と同様にRho GDIと複合体を形成しているRhoには作用できず、したがって、RhoからのGDPの解離を促進できなかった。以上、Rhoの機能と活性化機構の詳細がかなり明らかになり、当初の研究目的はほぼ達成することができた。
在这项研究中,我们研究了Rho低分子量G蛋白的功能和激活机制。当生长因子应用于细胞时,通过肌动球蛋白系统诱导细胞膜和细胞运动。当Rho GDI通过抑制GDP从RHO抑制RHO激活的Rho GDI将胰岛素和HGF诱导的细胞膜褶皱微注射。 GTPGAMMAS-RAC恢复了胰岛素诱导的荷花的抑制作用(RAC是一种低分子量G蛋白,类似于RHO),并且GTPGAMMAS-RHO分别恢复了HGF诱导的荷叶鱼的抑制。此外,当将Rho GDI显微注射到角质形成细胞308R细胞中时,抑制了由HGF诱导的细胞运动。 GTPGAMMAS-RHO恢复了这种抑制作用。 - 我们已经发现了GDP解离启动子蛋白(SMG GD)和GDP解离抑制剂蛋白(Rho GDI),作为作用于Rho的活性控制蛋白并分析其特性。最近,据报道,DBL致癌基因产品与Rho相似。今年,我们讨论了DBL是否将充当Rho的GD。在大肠杆菌中表达和纯化的DBL促进了属于Rho家族的Rho,RAC和CDC42的GDP/GTP交换反应。我们以前的分析表明,SMG GD仅对RHO进行了反译本修饰的RHO,但DBL对RHO的活性也更高,RHO进行了翻译后修饰。此外,DBL无法像SMG GD一样对Rho进行Rho,该Rho与Rho GDI复合,因此无法促进GDP与Rho的解离。 Rho功能和激活机制的细节已经阐明,因此几乎实现了原始的研究目标。

项目成果

期刊论文数量(9)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Takaishi,K.: "Involvement of tho p21 and its inhibitory GDP/GTP exchange protein (rho GDI) in cell motility." Mol.Cell.Biol.13. 72-79 (1993)
Takaishi,K.:“tho p21 及其抑制性 GDP/GTP 交换蛋白 (rho GDI) 参与细胞运动。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Sasaki,T.: "The nucleotide exchange rates of Rho and Rac small GTP-binding proteins are enhanced to different extents by their regulatory protein Smg GDS." Biochem.Biophys.Res.Commun.194. 1188-1193 (1993)
Sasaki,T.:“Rho 和 Rac 小 GTP 结合蛋白的核苷酸交换率在其调节蛋白 Smg GDS 的作用下得到不同程度的增强。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Takaishi,K.: "Involvement of Rho p21 small GTP-binding protein and its regulator in the HGF-induced cell motility." Oncogene. 9. 273-279 (1993)
Takaishi,K.:“Rho p21 小 GTP 结合蛋白及其调节剂参与 HGF 诱导的细胞运动。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Sawai,T.: "Combination of arachidonic acid and guanosine 5'-0-(3-thiotriphosphate) induce translocation of rac p21s to membrane and activation of NADPH oxidase in a cell-free system." Biochem.Biophys.Res.Commun.195. 264-269 (1993)
Sawai,T.:“花生四烯酸和鸟苷 5-0-(3-硫代三磷酸) 的组合可诱导 rac p21 易位至膜,并在无细胞系统中激活 NADPH 氧化酶。”
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