がん細胞における染色体の不安定化と再配列に関与する因子の分子遺伝学的研究

癌细胞染色体不稳定和重排相关因素的分子遗传学研究

基本信息

批准号：
63010081
负责人：
瀬野悍二
金额：
$ 9.15万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ハムスターCHO細胞から染色体異常あるいは姉妹染色分体交換を誘発する温度感受性変異株を分離した。得られた25株は13相補性群に分類され、複数の遺伝子の変異が染色体異常や姉妹染色分体交換に関与することが示された。また、これらの変異株はS期に停止点をもつことから、染色体の安定保持にはDNA複製の正常な進行が重要であることが示唆された。2.マウスFM3A細胞をチミン飢餓におくと染色体DNA2重鎖切断が特定の領域に起こり、急激な細胞死が誘発される。今回、この現象がチミン飢餓に特異的なものではなく、dNTPプールの不均衡をもたらす処理に共通のものであることを示した。すなわち、dAdo等タボヌクレオチド還元酵素の阻害剤によっても起こった。また、このDNA切断には未知エンドヌクレアーゼが誘導されることを試験管内反応で示した。3.動物細胞においても大腸菌で知られているのと同様に、DNAのアルキル化によって起こる修飾塩基の中のO^6-メチルグアニンが突然変異に関与すること、及び組換えに関わっていることを、同塩基を特異的に除去するO^6-メチルグアニントランスフェラーゼに関する変異株を用いて実証した。4.DNAの高次構造変換と遺伝子発現制御の相関が間接的に示唆されている。同変換を行うトポソメラーゼIの阻害剤カンプトテシンがhsp70等の遺伝子発現を実際に抑制することを明らかにした。他方、リンパ芽球系細胞における腫瘍プロモーターTPAによるc-fos遺伝子の発現誘導がカンプトテシンによっても起こることを見出した。今年度の成果は、染色体の安定保持機構に関する諸因子の同定及び不安定性に関わるDNAあるいはクロマチン上の構造を解明する研究につながるものである。

1。从仓鼠CHO细胞中分离出诱导染色体异常或姐妹染色单体交换的温度敏感突变体。将获得的25个菌株分为13个互补组，并且显示多个基因中的突变与染色体异常和姐妹染色单体交换有关。此外，这些突变体在S相中具有停止点，这表明DNA复制的正常进展对于维持染色体稳定性很重要。 2。小鼠FM3A细胞饿死胸腺素时，在特定区域发生染色体DNA双链断裂，导致猝死。在这里，我们表明，这种现象不是针对胸腺嘧啶饥饿的特定的，而是导致DNTP库失衡的治疗方法共同的。也就是说，这也是由tabon核苷酸还原酶（例如dado）抑制剂引起的。此外，体外反应表明，在这种DNA裂解中诱导了未知的内切酶。 3。在动物细胞中，以及在大肠杆菌中已知的，使用与O^6-甲基鸟嘌呤转移酶相关的突变体证明了通过DNA烷基化发生的o^6-甲基鸟嘌呤，该突变体特别清除了碱。 4。已间接提出了DNA结构转化与基因表达调节之间的相关性。据透露，甲拓酶I的抑制剂Camptothecin进行了相同的转化，实际上抑制了HSP70等的基因表达。另一方面，我们发现肿瘤启动子TPA在淋巴细胞细胞中诱导了C-FOS基因表达，也会通过Camptothecin进行。今年的结果将导致鉴定与染色体稳定性保留和研究机制相关的因素，以阐明与不稳定性有关的DNA或染色质结构。