がん細胞における染色体の不安定化と再配列に関与する因子の分子遺伝学的研究

癌细胞染色体不稳定和重排相关因素的分子遗传学研究

基本信息

批准号：
01010067
负责人：
瀬野悍二
金额：
$ 10.18万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至 1990
项目状态：
已结题

项目摘要

細胞周期において染色体の不安定化が起こる機構として、S期における複製がらみのものが考えられる外、M期における染色体分配の異常も見逃せない。特に、最近の劣性変異による発がんが対立遺伝子の喪失(loss of heterozygosity)によることが明らかにされつつあるが、その機序はまさに染色体分配の異常である。本研究における染色体安定保持に関するCHO細胞温度感受性変異株の解析結果は、予期したように染色体異常を好発する変異株のうちのほとんどの相補性群がS期に停止点をもち、DNA合成能の低下を示した。また、染色体が分配された後の脱凝縮が異常になった温度感受性変異株の解析から、蛋白質のリン酸化と脱リン酸反応がM期の進行に重要な役割を担っていることが強く示された。他方、G2期に停止する温度感受性変異株の解析から、ヒストンH1のリン酸化がG2/M期における染色体の凝縮に必須であること、また、ヒストンH1リン酸化酵素がcdcー2遺伝子の産物であることが確認された。また、本変異株にヒト由来cdcー2 cDNAを導入すると予期通り正常表現型に戻った。チミジル酸ストレスは染色体DNAを特異的な長さ(50ー100kb)に切断し、その際、誘導性のエンドヌクレアーゼがその切断に関与することがすでに示されている。今回、DNA断片の末端塩基分析を行い、切断がA+Tに富む領域で特異的に起こることが示唆された。また、切断はS期の前半で複製を完了する染色体領域、後半に入ってはじめて複製する染色体領域のいずれにおいても均等に起こることが細胞のエリトリエータ遠心によって示された。他方、切断に関与すると考えられる誘導性エンドヌクレアーゼも部分的に精製され、マグネシウムを要求するものと要求しないものが複数種存在することが示された。より詳細な性質の解明が待たれる。

作为在细胞周期中发生染色体不稳定性的机制，在M期间，染色体分布的异常不能忽略S时期。特别是，已经揭示了由于近期由于丧失对立基因而导致的隐性突变（杂合性丧失）引起的隐性dargin，但该机制恰恰是异常的染色体分布。与预期的那样，对与染色体稳定性相关的CHO细胞温度敏感突变体的分析正如预期的那样，大多数突变体共享通常是异常的染色体异常，在S期间具有停止点，并且DNA合成能力显示出来减少。此外，对染色体后的还原的温度敏感变体的分析表明，蛋白质和磷酸盐的磷酸化对于M相的进展很重要。另一方面，从G2项中的温度灵敏度变异的分析中，H1 H1的磷酸化对于G2/M周期期间染色体的凝结至关重要，并且H1 H1磷酸化酶是CDC -2基因产物那是。另外，当将人类衍生的CDC -2 cDNA引入此奇怪的股票时，它返回到预期的正常表达类型。奇硅酸盐应激已被证明，将染色体DNA切成特定的长度（50-100kb），当时，诱导endnukulaase参与切割。这次，进行了DNA片段的末端分析，表明切割特别发生在充满A+T的区域。切割是通过细胞精神分裂生的细胞Elitratior离心表明的，该染色体区域在S时期的上半部分完成了重复的染色体区域，而染色体区域则是S.下半部的第一个重复的染色体区域。另一方面，被认为与切割有关的指南endnu -nukulary已部分完善，表明有多种需要镁且不需要的类型。正在等待阐明更详细的属性。