転写因子NF-κBによるアポトーシス抑制作用と発がん促進作用

转录因子NF-κB的凋亡抑制和促癌作用

基本信息

批准号：
15024255
负责人：
岡本尚
金额：
$ 4.1万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15024255/
关键词：
NF-κB p65 ユビキチン化転写活性化 AO7 RNA helicase A

项目摘要

NF-κBは発がんからその進展に至る様々な段階で促進的に作用することから、がん治療の有望な標的として注目されている。実際にその阻害剤の多発性骨髄腫や腎細胞癌などでアポトーシスを誘導し、臨床での有効性が確認され、すでにFDA認可を受ける薬剤もでてきた。我々はNF-κBの作用機構を分子レベルで明らかにし、さらに分子標的を絞り込むために、NF-κBの主要サブユニットp65(RelA)との相互作用因子の遺伝子クローニングを包括的に行ってきた。昨年までに、転写のコアクチベーター活性(FUS/TLS)やコレプレッサー活性(Groucho family)を同定したが、今年度の研究よりFUS/TLSがCBPをp65にリクルートすることにより転写活性を促進することを明らかにした。また、新たにE2ユビキチンリガーゼ類似蛋白AO7とRNA helicase A(RHA)をNF-κB転写促進因子として見い出した。AO7は核内に存在し、NF-κBによる転写の活性化を促進する。AO7の中央領域に存在するRING fingerはユビキチンリガーゼ活性に必須と考えられているが、このドメインを欠失したタンパクはdominant negativeにNF-κBの作用を抑えたことからAO7はNF-κBによる転写の活性化に必須であることが明らかになった。他方、ATPase活性を欠失させたRHA変異体はdominant negativeにNF-κの作用を抑え、RNAiで内在性RHAをノックダウンすることにより種々の刺激によるNF-κB依存性転写を抑えた。以上のことより、AO7とRHAはいずれもNF-κBの転写活性に必須であることが明らかになった。

NF-κB 作为癌症治疗的一个有前景的靶标而引起人们的关注，因为它在从癌发生到进展的各个阶段都发挥着促进作用。事实上，其抑制剂已被证明可以诱导多发性骨髓瘤和肾细胞癌的细胞凋亡，并且其临床疗效已得到证实，部分药物已获得 FDA 批准。为了从分子水平阐明NF-κB的作用机制，进一步缩小其分子靶点，我们对NF-κB主要亚基p65（RelA）相互作用因子进行了全面的基因克隆。直到去年，我们才确定了转录共激活因子活性 (FUS/TLS) 和辅阻遏物活性（Groucho 家族），但今年的研究表明，FUS/TLS 通过将 CBP 招募到 p65 来促进转录活性。此外，我们新发现了E2泛素连接酶样蛋白AO7和RNA解旋酶A（RHA）作为NF-κB转录启动子。 AO7 存在于细胞核中并通过 NF-κB 促进转录激活。存在于 AO7 中心区域的环指被认为对于泛素连接酶活性至关重要，但缺乏该结构域的蛋白质以显性负向方式抑制 NF-κB 的作用，表明 AO7 不是由 NF-κB 转录介导的被发现对于激活至关重要。另一方面，缺乏 ATPase 活性的 RHA 突变体抑制了 NF-κ 对显性失活的影响，并通过 RNAi 敲低内源性 RHA，抑制了各种刺激诱导的 NF-κB 依赖性转录。由上可知，AO7和RHA对于NF-κB的转录活性都是必需的。