KSHV K3,K5遺伝子による抗原提示関連分子の抑制機構とその意義

KSHV K3和K5基因抑制抗原呈递相关分子的机制及其意义

• 批准号: 14021071
• 负责人: 石戸 聡
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021071/
• 关键词: 免疫抑制; ウイルスゲノム; 主要組織適合抗原; エンドサイトーシス

昨年度においてK3の機能domainを決定した。そのうち、BKS-PHD/LAP domainはRING domainと類似している事、さらにRING domainはE3ユビキチンリガーゼ(E3)活性domainである事よりK3のE3活性を調べた。MHC class Iを基質として293T細胞にK3と共に発現させると、有意にユビキチン化されたMHC Iを認めた。これらの事よりK3はMHCIにおけるE3ユビキチンリガーゼである事が示唆された。さらに、ヘルペスウイルスは様々な宿主機能分子のホモログを持つていることより、K3,K5蛋白も同様に宿主由来ではないかと考えた。よって、ヒト、マウスゲノムにおいてK3,K5類似分子の探索を行った。その結果c-MIRと名付けた興味ある新たなE3ユビキチンリガーゼを見い出した。この分子は、K3,K5のBKS-PHD/LAP domainと同様のmotifを持っており、類似二次構造を持つている。この分子をB細胞に発現させるとMHC class II, B7-2の細胞表面における発現が顕著に抑制された。さらに、B7-2をユビキチン化する事とその活性にはBKS-PHD/LAP domainが必要である事を見い出した。また、B7-2を用いて詳細に検討すると、B7-2の抑制にはc-MIRとの結合、c-MIRによるB7-2の細胞内領域にあるリジン残基のユビキチン化が必要である事が明かとなった。現在、c-MIRの生理機能の探索を行っている。今後、同族E3と考えられるK3,K5,c-MIRの分子機構を探索していく予定である。

去年，我们确定了K3的功能域。其中，BKS-PHD/LAP结构域与RING结构域相似，而RING结构域是E3泛素连接酶（E3）活性结构域，因此我们研究了K3的E3活性。当使用 MHC I 类作为底物在 293T 细胞中与 K3 一起表达 MHC I 类时，观察到显着泛素化的 MHC I。这些结果表明 K3 是 MHCI 中的 E3 泛素连接酶。此外，由于疱疹病毒具有多种宿主功能分子的同源物，我们认为K3和K5蛋白也可能来源于宿主。因此，我们在人类和小鼠基因组中寻找与K3和K5相似的分子。结果，我们发现了一种有趣的新 E3 泛素连接酶，我们将其命名为 c-MIR。该分子具有与K3和K5的BKS-PHD/LAP结构域相似的基序，并且具有相似的二级结构。当该分子在B细胞中表达时，细胞表面MHC II类B7-2的表达被显着抑制。此外，我们发现 BKS-PHD/LAP 结构域是 B7-2 泛素化及其活性所必需的。此外，使用B7-2的详细研究表明，B7-2的抑制需要与c-MIR结合并且通过c-MIR使B7-2的细胞内区域中的赖氨酸残基泛素化。目前，我们正在探索c-MIR的生理功能。未来，我们计划探索K3、K5和c-MIR的分子机制，它们被认为是E3的同源物。

项目成果

石戸, 聡: "免疫抑制性ウイルス蛋白とその機能類似分子群"臨床免疫. 39・6. 153-160 (2003)

Ishido，Satoshi：“免疫抑制病毒蛋白及其功能相似的分子”临床免疫学 39・6（2003）。

Means, R.E.: "Related Immune evasion strategies of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus"Curr Top Microbiol Immunol. 269. 187-201 (2002)

手段，R.E.：“卡波西肉瘤相关疱疹病毒的相关免疫逃避策略”Curr Top Microbiol Immunol。

Ishido, Satoshi: "c-MIR, a human E3 ubiquitin ligase, is a functional homolog of herpesvirus proteins MIR1 and 2 and has similar activity"J Biol Chem. (In press). (2003)

Ishido, Satoshi：“c-MIR 是一种人 E3 泛素连接酶，是疱疹病毒蛋白 MIR1 和 2 的功能同源物，具有相似的活性”J Biol Chem。

石戸, 聡: "ウイルスによる抗原提示抑制機構"蛋白質核酸酵素. 47・16. 22145-22151 (2002)

石户聪：“病毒抗原呈递抑制机制”蛋白质核酸酶47・16（2002）。