カポジ内腫関連ヘルペスウイルス蛋白による免疫調節分子の抑制機構とその意義

卡波西瘤内相关疱疹病毒蛋白对免疫调节分子的抑制机制及其意义

• 批准号: 13226076
• 负责人: 石戸 聡
• 金额: --
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226076/
• 关键词: 免疫抑制; ウイルスゲノム; 主要組織適合抗原; エンドサイトーシス

K3によってendocytosisを受けたMHC class Iの細胞内移動を、confocal microscopyにて検討した。その結果、endocytosisされたMHC class Iはγ-adaptinと局在が一致し、さらにLAMP-2とも局在が一致した。このことより、endocytosisを受けたMHC class Iは、Trans-Golgi Network(TGN)に輸送され、さらにlysosomeへ運ばれ分解を受ける事が明かとなった。これらのMHC class Iの細胞内動態は、HIV nef遺伝子のCD4 endocytosis促進機能と類似している事より、nef遺伝子の例を参考に機能的アミノ酸配列モチーフを検討した。まず、K3におけるYXXΦモチーフを調べると、cytoplasmic tailと予測される部位にいくつかのモチーフが見い出された。このcytoplasmic tailを欠損させ機能を検討すると、193番目のアミノ酸まで機能を保持したまま欠損する事が可能であった。しかし、cytoplasmic tailを完全に欠損させると機能は完全に消失した。このことより、193番目までのcytoplasmic tail部位が機能に重要である事が明かとなった。この部位を類似遺伝子であるK5と比較すると、興味ある事に高い保存性を示していた。この部位の詳細な検討により、YAAV motif, NTRV motif, acidic cluster motifの重要性が明かとなった。これらの結果は2002年,The EMBO Journalに掲載予定である。

使用共聚焦显微镜研究了通过K3进行内吞作用的MHC I类的细胞内迁移。结果，内吞作用MHC I类位于γ-适应素中，定位也与LAMP-2一致。这表明患有内吞作用的MHC I类将被运输到跨加利基网络（TGN），然后运输到溶酶体进行拆卸。因为MHC I类的细胞内动力学类似于HIV NEF基因的CD4内吞作用促进功能，因此我们使用NEF基因的示例研究了功能性氨基酸序列基序。首先，在检查K3中的YXXφ基序时，在预测为细胞质尾部的位点发现了几个基序。当删除这种细胞质尾巴并检查其功能时，可以在保留其功能的同时缺乏至193氨基酸。但是，完全缺乏细胞质尾巴已完全消失。这表明193片细胞质尾部位点对于功能很重要。当将此位点与类似的基因K5进行比较时，有趣的是，它显示出很高的保守性。对该站点的详细检查揭示了YAAV基序，NTRV基序和酸性簇基序的重要性。这些结果将于2002年发表在EMBO杂志上。