抗原提示分子を標的とするE3ユビキチンリガーゼの探索、機能解析とその応用

寻找针对抗原呈递分子的E3泛素连接酶、功能分析及其应用

• 批准号: 15019064
• 负责人: 石戸 聡
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019064/
• 关键词: ユビキチンリガーゼ; ユビキチン化; ヘルペスウイルス; 免疫抑制

我々は、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス(KSHV)の免疫回避に関与するMIR1,2分子を見い出し、さらに、本領域による研究費にて、興味ある構造的機能的類似分子群(c-MIR, HSPC240ファミリー)を哺乳類ゲノムに見い出した(JBC 2003)。c-MIRは、ウイルスMIR2と同様にB7-2を抑制する事ができるが、さらにMHC class IIをも抑制する。KSHV MIR1,2と現在までに見い出した類似分子群は、すべて同様の二次構造を持っており、E3ユビキチンリガーゼ活性をもつBKS-PHD domainを同じ部位に持っており、抗原提示関連分子を抑制する事が明らかとなった。よって、ウイルスMIR1,2と哺乳類の類似分子群を総括し、免疫抑制性E3ユビチンリガーゼファミリーと名付け研究を行っている。c-MIRが免疫制御を可能とする分子であるか否かを検討する目的にて、c-MIR過剰発現細胞を用いて抗原提示機能を検討した結果、OVAおよびそのペプチドに対する抗原提示機能は顕著に抑制されていた。さらにc-MIRを過剰に発現する遺伝子改変マウスを作成した所、B細胞にてMHC class IIの顕著な発現抑制が認められた。現在、このマウスの詳細な解析を行っており、c-MIRの人為的免疫制御への応用の可能性を検討している所である。さらに、c-MIRの生理機能を探索する目的にて、c-MIR mRNAの発現レベルを検討した。興味あることに、胸腺にてはほとんど発現を認めなかったが、ヒト、マウス未熟樹状細胞に有意にc-MIR mRNAを検出した。この発現はLPSによる刺激によって発現は抑制された。これらの事からc-MIRは抗原提示亢進によって発現が抑制される可能性が明らかとなった。さらにc-MIRのknock out mouseを作成し検討している。

我们发现MiR1,2分子参与了Kaposi肉瘤相关的疱疹病毒（KSHV）的免疫逃避，还发现了一组在该地区的研究资金中的哺乳动物基因组中的一组功能性相似的感兴趣分子（C-MIR，HSPC240家族）（JBC 2003）。 C-MIR可以以与病毒miR2相同的方式抑制B7-2，但也可以抑制MHC II类。迄今为止发现的KSHV miR1,2和类似的分子都具有相似的二级结构，并且在同一位点具有E3泛素连接酶活性的BKS-PHD结构域，表明它抑制了抗原表现相关的分子。因此，我们总结了类似的病毒miR1,2和哺乳动物分子，并通过命名免疫抑制E3 Ubitine连接酶家族进行了研究。为了研究C-MIR是否是一种可以进行免疫调节的分子，我们使用C-MIR过表达的细胞研究了抗原表现功能，发现OVA及其肽的抗原表现功能得到了显着抑制。此外，当产生过表达C-MIR的遗传改变的小鼠时，在B细胞中观察到MHC II表达的显着抑制。我们目前正在对这只小鼠进行详细分析，并正在考虑C-MIR在人工免疫调节中的潜在应用。此外，研究了C-MIR mRNA的表达水平以探索C-MIR的生理功能。有趣的是，尽管在胸腺中观察到很少的表达，但在人和小鼠未成熟的树突状细胞中显着检测到C-MIR mRNA。 LPS刺激抑制了这种表达。这些发现表明，C-MIR的表达可能会因抗原表现增加而抑制。此外，我们正在创建和考虑C-MIR敲除鼠标。

项目成果

石戸聡: "新たな免疫抑制性E3ユビキチンリガーゼファミリー"Molecular Medicine. 40. 312-320 (2003)

Satoshi Ishido：“一种新的免疫抑制 E3 泛素连接酶家族”《分子医学》，40. 312-320 (2003)。