C型肝炎ウイルス非構造蛋白NS4Aの細胞増殖及び細胞内情報伝達に及ぼす影響

丙型肝炎病毒非结构蛋白NS4A对细胞增殖和细胞内信号传递的影响

• 批准号: 08770218
• 负责人: 石戸 聡
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770218/
• 关键词: C型肝炎ウイルス; NS3; NS4A; 造腫瘍性; アポトーシス抑制; p53蛋白

1.C型肝炎ウイルス非構造蛋白質4Aを恒常的に発現する細胞(NS4A発現細胞)およびコントロールベクターのみを導入した細胞(pH8細胞)を用いて,以下の結果を得た。(1)NS4A細胞に,ヌードマウスにおける造腫瘍性は認められなかった。(2)NS4A細胞とpH8細胞を比較し,In vitro増殖能,アポトーシスの出現,c-fos mRNAの誘導において,明らかな違いは認められなかった。以上より,NS4Aの細胞機能に及ぼす影響は明らかでなかった。よって、NS4Aと結合し,密接な関係にあるNS3について,同様の検討を行った。2.C型肝炎ウイルス非構造蛋白質3を恒常的に発現する細胞(NS3発現細胞)およびpH8細胞を用いて,以下の結果を得た。(1)NS3細胞は,pH8細胞に比べて,アクチノマイシンDによるアポトーシスに対して,抵抗性であった。(2)アクチノマイシンDによるp53蛋白の誘導は,NS3細胞の方が,pH8細胞に比較し弱かった。これらの事より,NS3蛋白は,p53蛋白と相互作用し,アポトーシスを抑制する可能性が示唆された為,以下の実験を行った。3.NS3およびp53を一過性にHeLa細胞に発現し,それぞれの細胞内局在を観察し,相互作用について検討した。(1)NS3単独発現の場合,NS3は,細胞質,核に同程度存在したが,p53と共発現させると,両者共に核内に局在した。(2)この現象は,アミノ末端1/4を欠くNS3蛋白では,起こらなかった。これらの結果より,p53はNS3のアミノ末端1/4と結合し,NS3を核内へ集積させる可能性が示唆され,現在,p53とNS3の結合とp53の機能に対するNS3の影響を検討しているところである。

1。使用组成型表达丙型肝炎的非结构蛋白4A（表达NS4A的细胞）和仅用对照载体（PH8细胞）引入的细胞的细胞获得了以下结果。 （1）在NS4A细胞中的裸鼠中未观察到肿瘤性。 （2）比较NS4A细胞和PH8细胞，在体外增殖能力，凋亡的出现或C-FOS mRNA的诱导中未观察到明显的差异。从以上，NS4A对细胞功能的影响尚不清楚。因此，对NS3进行了类似的研究，该研究与NS4A结合并具有密切的关系。 2。使用组成性表达丙型肝炎病毒非结构蛋白3（表达NS3的细胞）和PH8细胞的细胞获得以下结果。 （1）NS3细胞对放线霉素D引起的凋亡具有比PH8细胞抗凋亡。 （2）放线霉素D比PH8细胞诱导p53蛋白。这些结果表明NS3蛋白与p53蛋白相互作用并抑制凋亡，因此进行了以下实验。 3。NS3和p53在HeLa细胞中瞬时表达，并观察到每个NS3和P53的亚细胞定位，并研究了相互作用。 （1）仅在NS3的情况下，NS3类似地存在于细胞质和核中，但是当与p53共表达时，它们都位于核中。 （2）在缺乏氨基末端1/4的NS3蛋白中没有发生这种现象。这些结果表明p53与NS3的氨基末端1/4结合，NS3可能会积聚在细胞核中，并且我们目前正在研究NS3对p53-NS3结合和p53功能的影响。

项目成果

Ishido,Satoshi: "Wild-type,but not mutant-type,p53 enhances nuclear accumulation of the NS3 protein of hepatitis C virus." Biochem.Biophys.Res.Commun.230(1). 431-436 (1997)

Ishido, Satoshi：“野生型而非突变型，p53 增强丙型肝炎病毒 NS3 蛋白的核积累。”