がん細胞の結合と脱離の機構

癌细胞附着和脱离的机制

基本信息

批准号：
02262216
负责人：
竹市雅俊
金额：
$ 9.6万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02262216/
关键词：
3Y1細胞カドヘリン src 転移浸潤がん細胞カテニンチロシンリン酸化

项目摘要

がん細胞の浸潤・転移における細胞間接着分子カドヘリンの関与を探るため、正常細胞株3Y1と、srcによりトランスフォ-ムしたsrc3Y1における細胞接着活性を比較した。これらの細胞をコラ-ゲンゲルの中で培養すると、3Y1は樹枝状の形態をもったコロニ-を形成し、その中で細胞は互いに接着しているが、src3Y1のコロニ-では、細胞が互いに密着せず、コロニ-周辺部において細胞が分散する傾向が観察された。src3Y1における接着性の変化が、カドヘリン発現の低下に基づくものであるかどうかを調べるために、これらの細胞にE型カドヘリンのcDNAをトランスフェクションし、この分子を過剰発現させた。これらの細胞をコラ-ゲンゲルの中で培養し、コロニ-を形成させ、細胞の脱離活性を調べると、カドヘリンの発現量がかなり増大しているにも関わらず、脱離活性には変化がなかった。すなわちsrc3Y1細胞では、カドヘリンを有効に利用できないなんらかの異常が生じていることが示唆された。つぎに、この細胞で起きている異常とは何かを探るため、カドヘリンと、これに結合しているカテニンに、チロシンリン酸化が起きていないかどうか、抗リン酸化チロシン抗体を用いて調べた。その結果、カテニンが強くリン酸化を受けていることが明らかになり、これがカドヘリンの機能に影響を与えていることが示唆された。

为了探索细胞间粘附分子钙粘着蛋白参与癌细胞侵袭和转移，我们比较了由SRC转化的正常细胞系3Y1和SRC3Y1中细胞粘附活性。当这些细胞在胶原蛋白凝胶中培养时，3Y1形成具有树突状形态的菌落，其中这些细胞彼此粘附，但是在SRC3Y1的菌落中，细胞并不彼此粘附，并且细胞倾向于在菌落区域分散。为了研究SRC3Y1中的粘附是否基于钙粘蛋白的表达降低，将这些细胞用E型钙粘蛋白的cDNA转染并过表达该分子。当这些细胞在胶原蛋白凝胶中培养时，会形成菌落，并检查细胞的解吸活性，尽管钙粘着蛋白表达水平显着增加，但它们的解吸活性没有变化。换句话说，有人建议在无法有效利用钙粘着蛋白的SRC3Y1细胞中发生一些异常。接下来，为了找出这些细胞中发生的异常，我们研究了钙粘着蛋白中是否发生酪氨酸磷酸化，与其结合的蛋白酶尚未使用抗磷酸化的酪氨酸抗体进行酪氨酸磷酸化。结果表明，蛋白链蛋白蛋白被强烈磷酸化，这表明这会影响钙粘着蛋白的功能。