発生・形態形式の個体レベルにおける分子生物学的研究

个体发育和形态水平的分子生物学研究

基本信息

批准号：
05NP0901
负责人：
竹市雅俊
金额：
--
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Creative Basic Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1997
项目状态：
已结题

项目摘要

ニワトリ及びマウス初期胚において発現する新しいカドヘリンを複数同定し発現を調べた。そのうちあるものは、神経冠の一部の細胞だけが発現し、しかも、その細胞は特定の限られた組織に分化した。これは、神経冠細胞群が分化方向に応じて異なるカドヘリンを発現し、その行動制御に関わることを示唆している。また、他のカドヘリンは、神経管の融合部位のみ、あるいは特定の神経核のみで発現されるなど、形態形成上興味深い多くの発現パターンが明らかになった。一方、ショウジョウバエのカドヘリンを同定することに成功し、無脊椎動物にもカドヘリンが存在することを初めて示した。ニワトリalphaAクリスタリン遺伝子のエンハンサーalphaCE1領域に結合する因子のcDNAクローンを得た。この因子は、ショウジョウバエ転写因子Elflと相同性があった。またalphaCE2結合因子はc-mafであることが判明した。さらに、deltaクリスタリン発現抑制因子deltaEF1がE2boxに対して抑制因子として働くこと、deltaEF2がSoxファミリーに属することが明らかになった。deltaEF2の強制発現はdeltaクリスタリンエンハンサーを活性化した。さらに、deltaEF1欠損マウスの作製に成功した。始原生殖細胞特異的なレセプター型キナーゼ遺伝子を4種類分離した。このうちGCK3はPolo様キナーゼで、精原細胞、精母細胞、卵母細胞で発現されていた。遺伝子トラップにより得られたAyul遺伝子は大脳皮質後頭葉や十二指腸神経節で発現され、その遺伝子座の近傍にlethal spottingという遺伝子変異が存在することが明らかになった。ショウジョウバエrepo遺伝子を解析し、グリア細胞特異的に発現され、神経遊走のguidance cueとしての役割を持つことを示唆した。また、ショウジョウバエ神経得意的RNA結合因子musashiのマウス相同遺伝子の単離に成功した。ショウジョウバエにおいて特定の筋肉のみで発現するコネクチンcDNAをTollのエンハンサーにつなぎ他の筋肉で異所的に発現させると、運動神経の遊走異常が起きることを発見した。この結果は、コネクチンが神経、筋肉認識因子として作用することを初めて示したものである。消化管の領域特異的な分化と、Hox遺伝子群の発現パターンの関係を調べた。その結果、Hoxa-4、Hoxa-5、Hoxa-6の前方発現境界は、それぞれ、前胃と食堂、前胃と左嚢、砂嚢と十二指腸の境界にあった。これは、消化管の領域特異的分化にHox遺伝子群が関与していることを示唆している。チロシンキナーゼsrm、Fakの欠損マウスを作製した。後者は体幹部に形成異常があったが頭部は正常であった。また、前年度作製したCsk欠損マウスの神経上皮は培養下では正常に増殖分化することを明らかにした。

鉴定出在鸡肉和小鼠早期胚胎中表达的多种新的卡德蛋白，以检查表达。在某些情况下，仅表达细胞冠的一部分，并将细胞分化为特定的组织。这表明神经冠细胞组在分化方向上表达不同的卡德林，并参与了行为控制。此外，仅在神经管的融合部位或仅在特定的神经 - 核中表达了许多其他Cadhedherines，并且揭示了许多形式的形成模式。同时，他成功地识别了shoujo bais的钙粘蛋白，这是无脊椎动物动物的第一次，有一种钙粘蛋白。我得到了与鸡αAlphaCrystalin基因的增强子alphace1区域结合的因子的cDNA克隆。该因子与Shoujo Bais转移因子ELFL同源。事实证明，alphace2结合因子是C-MAF。此外，已经揭示了三角晶蛋白表达抑制因子deltaef1作为E2Box的抑制因子，而Deltaef2属于Sox家族。 Deltaef2的强制表达激活了Delta Cristarinen Tresser。此外，他成功地产生了Deltaef1缺乏的小鼠。特异性的四种类型的生殖细胞类型受体 - 类型激酶基因。 GCK3是类似polo的激酶，在精子细胞，自发细胞和橡木细胞中表达。通过遗传陷阱获得的Ayul基因在脑皮质叶子和十二指肠的神经节中表达，并揭示出存在一个称为leth的基因斑点的基因突变。分析了回购基因，并建议它在神经胶质细胞中特别表达，并作为神经发挥作用。此外，他成功地分离了小鼠RNA结合因子Musashi的小鼠相基因。在Shoujo Bais中，发现仅用特定肌肉表达的连接蛋白cDNA被发现与Toll的增强子连接时具有动员神经异常，并在其他肌肉中与其他肌肉表达。结果是第一个表明连接素充当神经和肌肉识别因子。检查了胃肠道区域特异性分化与HOX基因组的表达模式之间的关系。结果，Hoxa-4，Hoxa-5和Hoxa-6之间的前边界位于前胃和自助餐厅之间的边界，前胃和左囊以及蒲公英。这表明HOX基因组参与胃肠道的特定分化。产生了酪氨酸激酶SRM和FAK失踪小鼠。后者在树干中形成异常，但头部正常。此外，已经揭示了上一年产生的CSK缺陷小鼠的神经抑制性上皮通常在培养下被增殖。