発生・形態形成の個体レベルにおける分子生物学的研究

个体发育和形态发生水平的分子生物学研究

基本信息

批准号：
06NP0901
负责人：
竹市雅俊
金额：
--
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Creative Basic Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至 1997
项目状态：
已结题

项目摘要

1.脳におけるカドヘリンの発現パターンの詳細なマッピングを継続し、次の結果を得た。まず、初期胚の脳において複数のカドヘリンがニューロメアという構造単位を規定するように発現し、脳の分節化に重要な役割を果たしていることの証拠を得た。次に、カドヘリンがシナプスに存在する間接証拠を得た。これにより、カドヘリンが神経ネットワーク形成の鍵となる可能性が一層高まった。一方、ショウジョウバエの神経系において発現するカドヘリンを新たに同定し、その機能を分子遺伝学的に解明する手掛りを得た。2.ニワトリαAクリスタリン遺伝子のエンハンサーに結合するL-mafの発現分布を調べた結果、将来水晶体に分化する外胚葉領域で発現が始まり、しかも体全体の中でこの領域だけが陽性であった。この発見は、L-mafが水晶体分化の中心的制御因子である可能性を示唆している。3.始原生殖細胞由来EG細胞を生殖細胞欠失マウスに移植すると、生殖細胞特異的なマーカーにより認識される細胞が確認され、EG細胞から生殖細胞が誘導される可能性が示唆された。このシステムが確立すれば、生殖系の遺伝子操作が容易となりその意義は大きい。4.RNA結合蛋白質musashi遺伝子がマウス中枢神経系の幹細胞特異的に発現していることを明らかにした。5.ショウジョウバエの筋肉表面因子コネクチンをすべての筋肉で異所的に発現させることにより、神経-筋肉間の誘因的な認識分子として機能し得ることを明らかにした。また、F-スポンジンと相同性がある分子が一部の筋肉だけで発現されることを明らかにした。6.消化管におけるHoxBクラスターの発現を調べ、特に肺において構造的区画及びBMP4,Wnt5aなどのシグナル因子の発現と相関する興味深い発現パターンを発見した。7.Fak欠損マウスから細胞株を樹立し、細胞の移動能の低下、focal contactの欠失、microspikeの形成異常などを見い出した。また、Otx2欠損マウスを解析し、頭部の吻側、尾側の構造異常を認め、その頭部形成上の役割を証明した。8.神経前駆細胞で発現するHES-1のノックアウトマウスを作製し解析したところ、無脳症になること、また、神経分化が早熟的に起きることがわかった。9.初期発生の異常を引き起こすjmj遺伝子の構造を明らかにすると共に、新たに、胸腺、背部結合組織の異常を発見した。10.マウス原腸形成に関与する遺伝子のクローニングのためにPCRディファレンシャルディスプレイ法を適用し、部域特異的に発現される遺伝子がクローニングできることが確認された。

1。继续大脑中钙粘蛋白表达模式的详细映射，并获得以下结果。首先，我们获得了证据表明，多种钙粘蛋白以定义一个称为神经粒的结构单元的方式在早期胚胎的大脑中表达，并在脑部分割中起重要作用。然后获得突触中存在的钙粘着蛋白的间接证据。这进一步增加了钙粘蛋白是神经网络形成的关键的可能性。同时，在果蝇神经系统中表达的钙粘着蛋白是新鉴定的，并提供了线索以阐明其在遗传上的分子功能。 2。检查L-MAF的表达分布（与鸡αa晶体蛋白基因的增强子结合）的表达分布开始于外胚层区域，将来会在镜头中分化为镜头，只有整个身体的这个区域是阳性的。这一发现表明L-MAF可能是晶状体分化的中心调节剂。 3。当将原始生殖的EG细胞嫁接到细菌缺陷型小鼠中时，确认了通过生殖细胞特异性标记识别的细胞，这表明可以从EG细胞中诱导细菌细胞诱导的细菌诱导的细菌诱导的细胞细胞衍生的细胞。一旦建立了该系统，生殖系统的遗传操纵就很容易，其意义也很大。 4。据揭示了RNA结合蛋白麝香基因在小鼠中枢神经系统干细胞中特异性表达。 5。我们已经揭示了果蝇肌肉表面因子连接素可以通过异位表达所有肌肉中果蝇肌肉表面因子连接蛋白来充当神经肌肉诱导识别分子。它还揭示了与F-Spondin同源的分子仅在某些肌肉中表达。 6。我们研究了HOXB簇在胃肠道中的表达，并发现了有趣的表达模式，这些模式与结构隔室的表达和信号因子（例如BMP4，Wnt5a等）相关。 7。从FAK缺陷型小鼠中建立了细胞系，发现细胞迁移能力降低，局灶性接触缺失和微传感器的发育不良。此外，我们分析了OTX2缺陷型小鼠，并在头部的尾部和尾端发现了结构异常，证明了它们在头部形成中的作用。 8。当我们准备并分析在神经祖细胞中表达的HES-1基因敲除小鼠时，我们发现脑病和神经分化会先验。 9. JMJ基因的结构在早期发育中引起异常，并发现了胸腺和背结缔组织的新异常。 10。将PCR差异显示方法应用于参与小鼠胃肠道的克隆基因，并证实可以特异性地表达的基因可以克隆。