ペルオキシソームの形成と機能発現制御を司るPEX遺伝子システムの解明

阐明控制过氧化物酶体形成和功能表达的 PEX 基因系统

基本信息

批准号：
13206060
负责人：
藤木幸夫
金额：
$ 4.16万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1)長年不明であった相補性群6群のZellweger症候群患者由来線維芽細胞の相補性群を再検証した結果、相補性群C群(PEX6,欧米4群)と同一相補性群であること、PEX6の発現によりペルオキシソームの形成不全が相補されかつPEX6変異を見出した。この結果、ペルオキシソーム形成異常症は現在のところ12種の相補性群に分類されることになる。2)私たちは、PTS1レセプターであるPex5pには哺乳動物系ではPex5pSおよびPex5pL(S型内部215-216の間に37アミノ酸の挿入配列)が存在すること、Pex5pLはPTS2タンパク質の輸送をPTS2レセプターPex7pと結合することにより担っている。Pex5pLのPex14pおよびPex13pとの結合にはN末端側(1-243)に存在する7個のWxxxF/Y motifsが必須であること、Pex7pとはPex5pL特異的挿入配列のN末端側約半分とさらに上流側27アミノ酸領域で結合することを明らかにした。さらに詳細な解析の結果、PTS1カーゴは膜透過装置構成因子のPex14pを通過したのちPex13pの前で解離することが判明した。3)PTS2レセプターPex7pの機能、機能不全、細胞内局在について、独自に分離したpex7CHO変異細胞ZPG207およびPEX7異常RCDP患者由来線維芽細胞を用いて検討した。PTS2およびPex5pLとの結合にはほぼ全長が必要であること、RCDP患者中現在までに報告されている3種の変異(L292ter, G217R, A218V)およびZPG207由来Pex7p-W221terはいずれもPTS2およびPex5pLとの結合活性を失うことを見出した。さらにPex7pは細胞質に大半は存在するが、一部はPex5pL依存的にペルオキシソームマトリックス内に局在化することから、Pex5pと同様にshuttling receptorとして機能しているものと結論した。

1）由于多年来未知的六组互补组的互补患者的互补组重新介绍了Zellweger综合征患者的互补患者，它与C组是相同的阶段互补组（PEX6，4通用欧洲和美国。结果，当前将过氧化物酶形成异常分为12个互补组。 2）我们的PTS1受体PEX5P具有PEX5PS和PEX5PL（S型内部215-216之间的37个氨基酸插入），而PEX5PL是运输PTS2蛋白的PTS2受体。 N端侧存在七个WXXXF/Y基序（1-243）是PEX5PL PEX14P和PEX13P之间的键，以及PEX5PL特异性插入序列的N-端侧的一半。它将在上游的27个氨基酸区域结合。此外，详细的分析表明，PTS1货物通过PEX14P，这是膜通透性构型因子，然后在PEX13P前面解离。 3）使用独立的分离的PEX7CHO可变细胞ZPG207和PEX7异常RCDP患者检查了PTS2受体PEX7P功能，功能失效和细胞内定位。 PTS2和PEX5PL的组合几乎需要总长度，而RCDP患者（L292TER，G217R，A218V）和PEX7P-W221Ter衍生自ZPG207的三种类型的组合是PTS2和PEX5P的PEX7P-W221Ter。此外，PEX7P大多在细胞质中，但有些部分位于Pelooxoma基质中以及PEX5P中，因此它可以用作穿梭受体的功能。