ペルオキシソーム形成因子群の膜インターフェイス機能と動態制御

膜界面功能和过氧化物酶体形成因子的动态控制

基本信息

批准号：
19036020
负责人：
藤木幸夫
金额：
$ 4.03万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は以下の研究項目に取り組み、独創性の高い成果を挙げることができた。1) ペルオキシソームマトリックスタンパク質の輸送・局在化機構の解明ペルオキシソーム移行シグナル1(PTS1)受容体、Pex5pの膜状ドッキング因子Pex14pのN-末側領域、Pex14p(25-70)の結晶構造解析に成功、3個のヘリックスからなるドメイン構造を明らかにした。また、保存性が高く重要なPhe-35およびPhe-52を含む結合部位(Sites 1&2)にPex5pのペンタペプチドモチーフWXXXF/Yがすっぽりはまり込む構造をとっていることも見出した。2) ペルオキシソーム膜タンパク質の輸送と膜形成機構膜形成因子Pex19pは、新規合成されたペルオキシソーム膜タンパク質と細胞質中で複合体を形成、経時的にペルオキシソーム膜上に標的化すること、その標的分子がPex3pであることが見出された(Class I ; Pex19p-and Pex3p-dependent membrane protein import pathway)。今回、Pex3pの輸送機構をセミインタクト細胞系、無細胞輸送系などを確立し検討したところ、Pex3pは上記PMPと同様にシトゾールで翻訳後Pexlgpと複合体を形成、膜上Pex16pを標的として局在化することを明らかにした(Class II : Pex19p-and Pex16p-dependent membrane protein import pathwayを提唱した)。3) ペルオキシソームの分解系動物細胞ではほとんど不明のペルオキシソーム分解系の分子機構を明らかにすべく種々検討した結果、ペルオキシソーム特異的なオートファジーと思われる現象(リソゾームでの分解)が起きることを、初めて形態学的および生化学的に見出した。その特異的分解には、LC3(Atg8)およびペルオキシソーム形成因子Pex14pの関与を見出した。4) エーテルリン脂質プラスマローゲンの機能と制御機構ペルオキシソームは、重要なリン脂質プラスマローゲンの生合成経路のうち初期2段階反応をdihydroxyacetone-phosphate acyltransferase(DHAPAT)およびalkyl-dihydroxyacetonephosphate synthase(ADAPS)により担う。プラスマローゲンの機能と輸送機構の解明を目的とし、ADAPS障害性CHO変異細胞株ZPEG251の分離に成功した。プラスマローゲンのペルオキシソーム-小胞体での生合成終了後の膜への輸送経路を検討した結果、post-Golgi区画に局在化した。その輸送はATP依存性であるが、微小管形成や小胞輸送の阻害剤の影響は受けない経路であることも見出した.

今年，我们研究了以下研究项目，并取得了高度原始的结果。 1）流动性矩阵扎克克的运输，定位机制过氧化物酶迁移信号1（PTS1）受体，PEX5P膜状的对接因子PEX14P N端面积，PEX14P（25-70）成功的晶体结构分析，域结构，域结构，螺旋被发现。此外，发现PEX5P PEX5P的戊肽基序WXXXF/y拟合到结合位点（位点1＆2），该结构已保存高且重要，具有PEX5P五角杆菌基序的结构，该结构完全卡住了。 2）Pelooxyome膜蛋白的转运和膜形成机理膜形成因子PEX19P，在新的合成pelooisomm膜蛋白和细胞机中形成复合物，并将其靶向过时的膜，并且它们的目标分子是I类。 PEX19P和依赖性膜蛋白导入途径）。这次，建立并检查了PEX3P传输机制，并检查了半插裂细胞系统，无细胞运输系统等，以及在上述PMP中和形成PEXLGP和复合物，PEX16P On on Pex16p on the pmp中的citosol中翻译中的PEX3P。膜PEX16P。 3）第一次在几乎未知的pelooosomed溶液系统的分子机制中，首次检查了似乎是一种胸肌特异性自噬的现象。生化。发现特异性分解与Peloxisome形成因子的LC3（ATG8）和PEX14P有关。 4）Eterno脂质加乳腺功能和控制机制Peloxosomu是二羟基转移酶（DHAPAT）和烷基 - 二氢重要的磷脂和大型甲脂蛋白的早期反应。为了阐明血浆原质的功能和运输组织的解体，Adaps Cho Cho Cho可变细胞存量ZPEG251成功分离了。在速度结束时生计后，将运输途径到膜的静脉原质进行了质量检查，它们定位于后高尔基体中。尽管运输取决于ATP，但还发现它是不受微观形成和抑制性抑制剂影响的途径。