精神疾患の脳内遺伝子発現データベースの構築と分子病態解析

精神疾病脑基因表达数据库构建及分子病理分析

基本信息

批准号：
13204031
负责人：
那波宏之
金额：
$ 3.97万
依托单位：
Niigata University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13204031/
关键词：
精神疾患 RNA DNAアレイ遺伝子プロファイリング分子病態

项目摘要

精神疾患は、近代のストレス社会において、極めて多くの人が発症する難病である。本課題では、申請者らが保有する貴重な死後脳検体をゲノム資源として用い、多因子疾患である精神病の脳内病態変化を遺伝子レベルで評価できるシステムを、申請者らの実績にもとずくDNAアレイ法と最新PCR法により構築した。(1)リアルタイムPCR法を用いて、これまでにDNAアレイで遺伝子発現変化のみられた50遺伝子に対してその検証を試みた。変化率が大きい遺伝子については、このリアルタイムPCR法で追試が効いたが、変化率の小さなものは出来なかった。これは、PCRでの変化定量限界が2倍以上であるため、DNAアレイの定量検定検出感度の方が勝っているので、発現変化率の小さいRNAについてどの様に今後追試してゆくか、課題を残している。(2)当研究所保有の多数の貴重な精神分裂病患者とコントロールの剖検脳(帯状回)より高品質RNAを抽出し、33Pを用いたcDNA合成によりプローブを作製し、DNAアレイ約3000遺伝子の発現変化をプロファイリングした。各群6例ずつの統計解析の結果、フォスファターゼの遺伝子群が12.5%と最も高く、次いで、トランズポーター受容体チャンエル群の遺伝子群の8.2%、神経細胞特異的タンパク遺伝子群の6.0%等々と続いた。他の脳部位、線条体や前頭葉におけるプロファイリング結果とは、そのRNAプロファイルがおおきく異なり、精神分裂病において帯状回は特異な脳病態を示すことが判明した。(3)新しくできた遺伝子倫理規定に準ずる、本学において病理解剖同意手順を作製した。これにもとづき、より厳密な患者家族の同意の得た上で、更なる精神疾患剖検脳の収集、保存をはかった。これら遺伝子変動情報(分子プロファイル)をデータベース化することは、各病態の総合的解明につながるばかりでなく、当該精神疾患のゲノム多型解析の標的遺伝子に関する情報も与えるものである。

精神疾病是一种无法治愈的疾病，发生在现代压力社会中，这是许多人经历的一种无法治愈的疾病。在这个主题中，我们使用申请人持有的有价值的后脑大脑标本作为基因组资源，并创建了一个可以使用DNA阵列方法和最新的PCR方法来评估精神病的大脑病理学的变化，一种多因素疾病，基于申请人的成就。（1）我们试图在使用实时PCR中在DNA阵列中改变基因表达的50个基因上验证这一点。对于具有较大变化率的基因，这种实时PCR方法提供了重新检查，但不可能进行较小的变化率。这是因为PCR变化的量化极限是高度的两倍以上，并且对DNA阵列的定量测定检测的敏感性很高，这使我们对如何跟踪未来表达速率较小的RNA。（2）从我们实验室持有的许多有价值的精神分裂症患者和对照组中从尸检大脑（c依扣回）中提取高质量的RNA，并使用33p通过cDNA合成制备探针，并介绍了DNA阵列中的表达变化。对每组6例患者的统计分析表明，磷酸酶基因组为12.5％，其次是转运蛋白受体香奈儿组的基因组的8.2％，占神经元特异性蛋白基因组的6.0％等等。 RNA谱与其他大脑区域，纹状体和额叶裂片的谱图大不相同，发现扣带回的回旋在精神分裂症中表现出独特的脑病理学。（3）我们创建了遵循新遗传伦理法规的病理尸检同意程序。基于此，在患者的更严格的同意下，尝试了进一步的大脑收集和存储。这些遗传变异信息（分子谱）的数据库不仅可以全面阐明每种疾病，而且还提供了有关精神疾病基因组多态性分析的靶基因的信息。