エイズワクチンの活性強化分子の分子設計法の基礎研究

增强艾滋病疫苗活性分子的分子设计方法基础研究

基本信息

批准号：
11161225
负责人：
杉村和久
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kagoshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.Molecular molding design:私どもはレセプター/リガンド結合部分の3次構造を認識するモノクローナル抗体を用いてファージライブラリーを探査し、この抗体に結合するファージクローンを単離すれば、抗体が鋳型として働き、リセプターとリガンドの結合部位の3次構造を直接コピーする可能性を検討してきた。2.CCR5-binding domain mimic:この観点から、M-tropic HIVー1の感染でcoreceptorとして機能するCCR5のmimeticsを試み、抗CCR5抗体(2D7)用い、BiopanningによりM23クローン単離した。このクローンはM-Tropic HIVー1感染を特異的に60%阻害し、T-tropic HIV-1感染には影響せず、また、ELISAにより、M23はMIP-1a,MIP-1bおよびRANTESと結合すること、しかしCCR2のリガンドであるMCP1には結合しないことを明らかにした。3.Monocyte Chemoattractant Protein(MCP-1)mimic peptides:MCP-1はCCR1,CCR2,CCR4に結合し単球遊走活性を有し、慢性関節リウマチ、多発性硬化症、腎炎などの慢性炎症性疾患、粥状動脈硬化症等の重要な因子である。CCR2を介したHIVー1感染ではMCP-1の感染阻害活性が報告されている。ケモカインレセプターの結合部位を塞ぐようなケモカイン様モチーフとしてMCP-1mimicのファージクローンを2種(C27およびG25)を単離した。その結果、1)モチーフ配列のみを化学合成した19merのC27およびG25ペプチドは、MCP-1によるヒト末梢血細胞のChemotaxisを阻害することを明らかにした。

1。分子成型设计：我们已经研究了一种可能性，如果我们使用识别受体/配体结合部分的三级结构的单克隆抗体，以及与该抗体结合的隔离噬菌体克隆，则抗体可以充当模板并直接复制受体和ligand ligand ligand的结合位点。 2.CCR5结合结构域模仿：从这个角度来看，我们尝试模仿CCR5，该ccr5用M-热带HIV-1的感染充当感染的共肽，并通过使用抗CCR5抗体（2D7）进行生物启动，通过生物启动进行分离的M23克隆。该克隆特异性地抑制了6％的M-热 - HIV-1感染，对T-Tropic HIV-1感染没有影响，ELISA显示M23与MIP-1A，MIP-1B和RANTES结合，但对CCR2配体MCP1没有。 3。单核细胞化学吸收剂蛋白（MCP-1）模拟肽：MCP-1与CCR1，CCR2和CCR4结合，具有单核细胞迁移活性，并且是慢性炎症性疾病（如类风湿关节炎），多发性硬化症，肾炎，肾小球炎和静脉内局局的重要因素。在CCR2介导的HIV-1感染中，MCP-1的感染抑制活性已报道。将两个MCP-1粘合噬菌体克隆（C27和G25）分离为趋化因子样基序，阻断了趋化因子受体的结合位点。结果表明，1）19mer C27和G25肽（仅化学合成基序序列）通过MCP-1抑制了人外周血细胞中的趋化性。