がん抑制遺伝子候補としての母性発現インプリント遺伝子群の単離

分离母系表达的印记基因作为抑癌基因候选

基本信息

批准号：
11138220
负责人：
伊藤隆司
金额：
$ 1.41万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11138220/
关键词：
インプリンティング核移植

项目摘要

1)核移植マウスの作製と評価東京農大の河野グループにより、脱核したB6マウス卵に(JFxJF)F1および(JFxB6)F1の受精卵核を移植したマウスが作製された。B6およびJFのミトコンドリアDNA上の制限酵素部位型を同定、PCR-RFLPによって両各移植系統のミトコンドリアDNAを検査した。その結果、前者11匹中に1匹、後者19匹中に4匹、移植核に付着した細胞質に由来すると思われるJFミトコンドリアの混入を認めた。これらを除いた核移植マウスはミトコンドリア多型の影響を排したアレリックメッセージディスプレイ(AMD)スクリーニングに利用できると考えられたので、これらの各種臓器からRNAを調製して、スクリーニングに着手した。2)新規インプリント遺伝子MA10の発見骨格筋を用いたAMDスクリーニングにより新規の父性発現遺伝子MA10を同定した。MA10は、骨格筋や脳では父性アレルのみが発現しているが、腸管や精巣ではほぼ両アレル性に発現していることから、組織特異的なインプリンティングを受けていることが判明した。MA10のcDNAには明らかなORFは認められなかった。またMA10のcDNAをFISHでマップすると7番染色体遠位部にマップされた。ここはヒトのBeckwith-Wiedemann症候群(BWS)の原因座位に相当する領域であったので、この領域のコンティグを用いて詳細なマップを行い、母性発現遺伝子Kvlqt1領域に由来する新しいアンチセンス転写物であることを明らかにした。overgrowth syndromeであるBWSでは種々の腫瘍が好発することが知られており、MA10の機能には大変に興味深いものがある。

1）由核移植小鼠制成，并评估了东京农业大学的KONO组创建了一只小鼠，该小鼠在突出的B6小鼠卵中被（JFXJF）的受精卵核（JFXJF）和（JFXB6）F1移植。鉴定了B6和JF的线粒体DNA上的限制酶部分类型，并通过PCR-RFLP检查了每个移植系统的线粒体DNA。结果，在前者中有11个中有1个，后来的4个，而JF线粒体的混合物似乎是从附着在移植核上的细胞质得出的。据认为，不包括这些的核移植小鼠可以用于消除线粒体多态性的等位基因消息显示（AMD）筛选，因此我们从这些器官中准备了RNA并开始筛选。 2）通过使用新烙印基因MA10的骨骼肌肉进行AMD筛选，通过AMD筛选确定了新的亲子关系基因MA10。 MA10仅由骨骼肌肉和大脑中的父亲等位基因表达，但是在肠道和睾丸中，发现它具有特定于组织的印记。 MA10 cDNA中没有明显的ORF。当Ma10 cDNA用鱼映射时，将其映射到第七染色体远处。这是一个相当于人类贝克维斯·韦德曼综合征（BWS）的原因，因此使用该区域的contign制作了详细的地图，而我透露了我透露的新的反义转录本那是。众所周知，过度生长综合征BWS具有许多肿瘤，MA10功能非常有趣。