アレリックメッセージディスプレイ法によるがん関連インプリント遺伝子の単離

使用等位基因信息显示方法分离癌症相关印记基因

基本信息

批准号：
10151210
负责人：
伊藤隆司
金额：
$ 1.22万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10151210/
关键词：
ゲノムインプリンティング GCN1 GCN2 核移植

项目摘要

がんとゲノムインプリンティングの関係は以前より注目を集めてきた。我々はインプリント遺伝子を組織的に検索する全く新しい独自の方法であるアレリックメッセージディスプレイ(AMD)法を開発し、これを用いて新規父性発現遺伝子Impactを同定した。今年度は、1) AMD法の弱点であった母性発現遺伝子とミトコンドリア転写物の識別を容易にする方法の確立2) モデル生物を用いたImpactの機能解析の2点を検討した。1) に関しては核移植技術を用いて進化的にかけ離れたゲノムを持ちながら、全く同一のミトコンドリアを持つマウスを作製した。これによって父性発現遺伝子のみならず母性発現遺伝子も同時に検索できるようになった。2) に関してはImpactの酵母ホモログYIH1(Yeast Impact Homolog 1)を解析した。その結果、・Yih1pはそのN末領域にある特異的モチーフを介してGcn1pに直接結合すること。・このモチーフを共有するeIF2αキナーゼGcn2pもYih1pと同様にGcnlpに結合すること。・Gcn1pとGcn2pとの結合は「アミノ酸合成の一般制御」を司るGCN系にとって必須であること。・Gcr1p-Gcn2p間相互作用を競合的に阻害することでYih1pはGCN系の機能、即ちeIF2αのリン酸化、を負に制御し得ること。の4点を明らかにした。eIF2αのリン酸化は翻訳開始効率を全般に低下させる最も有名な分子機構である。哺乳類でもそれが機能しており、その障害は細胞増殖の恒常的刺激、さらにはトランスフォーメーションを起こす。よって出芽酵母でのデータを外挿するとImpactはこのリン酸化を阻害して、翻訳のブレーキを外す役割を持ち、細胞増殖を正に制御する可能性が示唆された。

癌症与基因组印记之间的关系引起了人们的关注。我们已经开发了等位基因消息显示（AMD）ACT，这是一种全新的搜索烙印基因的独特方法，以识别新的亲子关系基因影响。今年，我们使用模型生物体检查了两点：影响力分析，这是AMD方法的弱点，这是AMD方法的弱点，也是一种简化线粒体转移鉴定的方法。关于1），在使用已经进化并具有完全相同的线粒体的核移植技术时产生了具有相同线粒体的小鼠。这不仅允许父亲表达基因，还允许同时孕产妇表达基因。对于2），分析了Impact的酵母同源物YIH1（酵母撞击同源1）。结果，・ YIH1P应通过N-区域中的特定基序直接束缚至GCN1P。共享此基序的・EIF2α激酶GCN2P也与yih1p这样的GCNLP结合。・GCN1P和GCN2P之间的键必须对于控制“氨基酸合成的一般控制”的GCN系统至关重要。 - GCR1P-GCN2P互连相互作用可以通过基于GCN的功能（即EIF2α的磷酸化）控制。揭示了四分。 EIF2α的磷酸化是最著名的分子机制，总体上降低了翻译起始效率。它在哺乳动物中起作用，这会导致细胞增殖的持续刺激以及转化。因此，当插入细菌酵母中的数据时，影响表明影响会抑制这种磷酸化，具有去除翻译制动的作用，并可能控制细胞增殖。