化学発癌における活性中間体の動態と標的臓番DNA傷害ー臓器よおび種特異性との関連

化学致癌作用中活性中间体和靶器官 DNA 损伤的动态 - 与器官和物种特异性的关系

基本信息

批准号：
04151059
负责人：
加藤隆一
金额：
$ 11.84万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1992
资助国家：
日本
起止时间：
1992 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

PhIPを投与するとラットにおいてのみ肝チトクロムP4501A2が誘導されたが、マウス、ハムスター、モルモットでは誘導が認められず、一方、腎ではP4501A2が誘導されずP4501A1のみがラットで誘導された。DinydoroxybenzanthraceneのDNAの付加体生成は幼若ラットでは高く、成熟ラットではきわめて低い点および硫酸抱合酵素の阻害剤で阻害される点から硫酸抱合の関与が立証された。l-Nitropyreneの腹腔内投与により腫瘍原性が陽性なCDラット、CD-1マウスおよびA/Jマウスでは乳腺、肝および肺に付加体が見出されたが、腫瘍原性が陰性なB6C3F1マウスでは肝および肺に還元性付加体が見出されなかった。肝に腫瘍を作るMeIQx投与群では肝のBrdU-Labeling Index(LI)が増加するが、腫瘍が発生しない腎や大腸ではLIは増加しなかった。一方、大腸に腫瘍を作るPhIP投与群では大腸においてLIは増加するが、肝および腎ではLIは増加せず、発癌臓器特異性はDNA付加体生成の外に細胞増殖が深く関与していることが明らかにされた。N-Hydroxyarylamineの硫酸エステル化を行う酵素(HAST)をラット肝より精製、クローニングし、COS-1細胞に発現し、DNA付加体を生成することを確認した。マウスのO^6-メチルグアニンDNAメチルトランスフェラーゼの遺伝子のクローニングに成功し、またそのcDNAを大腸菌で大量に発現させ、ジーンターゲテイングの実験およビ抗体作成を進行させた。癌原性物質は多様であり、その代謝的活性化に関与する酵素、中間活性化体の安定性、反応性などが異なる。これらが癌原性物質の臓器特異性や種差などに密接に関係していが、本研究の結果からも示されたように単にDNA adductの生成量ばかりでなく、DNA修復能や細胞増殖刺激能なども重要と思われた。

PhIP仅在大鼠中诱导肝细胞色素P4501A2，但在小鼠、仓鼠或豚鼠中未观察到诱导。另一方面，在大鼠的肾脏中，P4501A2未被诱导，仅P4501A1被诱导。由于二硝基苯并蒽的 DNA 加合物的形成在幼年大鼠中较高，但在成年大鼠中极低，并且被硫酸盐结合酶抑制剂抑制，因此证明了硫酸盐结合的参与。腹腔注射l-硝基芘后，致瘤性阳性的CD大鼠、CD-1小鼠和A/J小鼠的乳腺、肝脏和肺中发现加合物，但致瘤性阴性的B6C3F1小鼠没有。在肝脏或肺中发现了还原加合物。 MeIQx 给药组肝脏中的 BrdU 标记指数 (LI) 增加，导致肝脏中出现肿瘤，但肾脏或结肠中的 LI 没有增加，而肾脏或结肠中没有出现肿瘤。另一方面，在导致大肠肿瘤的PhIP治疗组中，LI在大肠中增加，但在肝脏或肾脏中没有增加，这表明除了DNA加合物之外，细胞增殖也与致癌器官特异性密切相关。形成。从大鼠肝脏中纯化并克隆了硫酸酯化 N-羟基芳胺的酶 (HAST)，在 COS-1 细胞中表达，并证实生成 DNA 加合物。我们成功克隆了小鼠O^6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶基因，并在大肠杆菌中大量表达该cDNA，并进行了基因打靶实验和抗体生产。致癌物质多种多样，其代谢激活所涉及的酶、中间激活形式的稳定性和反应性等也不同。这些因素与致癌物质的器官特异性和物种差异密切相关，但正如本研究结果表明，不仅仅是产生DNA加合物的量，还与修复DNA和刺激细胞生长的能力有关。认为重要。