制がん剤耐性獲得の多様な分子機構と耐性克服法の開発

获得抗癌药物耐药性的各种分子机制和克服耐药性方法的开发

基本信息

批准号：
01015090
负责人：
桑野信彦
金额：
$ 3.07万
依托单位：
大分医科大学
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

制がん剤耐性獲得に関与する機構の多様性を把握するために、我々は様々な制がん剤に対する耐性がん細胞株を樹立し、関与する耐性因子を検索した。同時に耐性因子を標的にした耐性克服法を開発する仕事を進めた。その結果、1.多剤耐性遺伝子mdrー1の発現に重要なプロモーター及びエンハンサー領域を単離し、ビンクリスチンをはじめとする制がん剤によってmdrー1遺伝子の発現が促進することを見出した。2.mdrー1遺伝子産物GP170を標的にしてジピリダモールならびに数多くのジハイドロピリジン系薬剤の中から培養系及び動物実験系で耐性克服する組合せを見出した。3.シスプラチン耐性株を樹立した。耐性株において親株に較べグルタチオンSートランスフェラーゼ(GST)が数倍上昇していること、さらに感受性復帰変異株においてGST活性が再び元に戻っていることを観察した。4.GSTーpiのcDNAを導入した株でGSTーpiが数倍上昇しており、2ー3倍のシスプラチン耐性を獲得することを見出した。5.エトポシドVPー16やテニポシドVMー26に対する50ー100倍の耐性株を単離し、DNAトポイソメラーゼII及びVPー16/VMー26の透過性が変化していることを観察した。今後、mdrー1遺伝子のプロモーター領域に結合する転写因子を明らかにするとともに、制がん剤による転写調節機構を把握したい。また、シスプラチン耐性についてはGST以外の耐性因子の同定ならびにVPー16/VMー26耐性を左右するDNAトポイソメラーゼの役割についての解析を進めていきたい。

为了了解获得抗癌耐药性涉及的机制的多样性，我们建立了对各种抗癌药物的耐药性癌细胞系，并搜索涉及的抗性因素。同时，该公司致力于开发方法来克服抗药性因素。结果，1。我们分离了启动子和增强子区域对于多药耐药基因MDR-1的表达很重要，并发现抗癌药（如vincristine）促进了MDR-1基因的表达。 2。我们发现靶向MDR-1基因产物GP170的组合以克服二吡啶胺和大量二氢吡啶药物中培养和动物实验系统中的耐药性。 3。建立了顺铂抗性菌株。我们观察到与母体菌株相比，抗抗性菌株中S-转移酶（GST）增加了几倍，并且在敏感的反转菌株中再次恢复了GST活性。 4。我们发现，GST-PI在用GST-PI cDNA引入的菌株中增加了几次，并且它获得了顺铂的2-3倍。 5。我们将50-100倍的抗性菌株分离为依托泊苷VP-16和Teniposide VM-26，并观察到DNA拓扑异构酶II和VP-16/VM-26的渗透性改变了。将来，我们想阐明与MDR-1基因启动子区域结合的转录因子，并了解抗癌药物的转录调节机制。此外，关于顺铂耐药性，我们想继续鉴定GST以外的抗性因子，并分析影响VP-16/VM-26抗性的DNA拓扑异构酶的作用。