ミトコンドリア膜透過性亢進機構を標的とした抗アポトーシス薬の開発

针对线粒体膜通透性机制的抗凋亡药物的开发

基本信息

批准号：
15025243
负责人：
清水重臣
金额：
$ 3.14万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025243/
关键词：
アポトーシス Bcl-2 ミトコンドリア

项目摘要

多くのアポトーシスはミトコンドリアの膜透過性亢進現象を起点として誘導されることから、ミトコンドリア膜透過性亢進機構を解明し、それを分子標的とした創薬は有用である。そこで本研究では、1)ミトコンドリア膜透過性亢進に関与する分子を網羅的にスクリーニングする、2)その知見を、基た抗アポトーシス薬を開発する、ことを目的とした。我々は、単離ミトコンドリアを用いてミトコンドリア膜透過性の多寡を測定するin vitro assay系を確立している。この系に、(1)肝ミトコンドリアの外膜成分に対するモノクローナル抗体のライブラリー(4000 クローン)、(2)低分子化合物のライブラリー、を添加し、膜透過性を安定化する抗体あるいは低分子化合物を探索した。その結果、数種類の抗体と1種類の低分子化合物を見いだした。これらの抗体や化合物は細胞レベルの実験において、確かにアポトーシスに対する影響を発揮した。現在、これらの抗体や低分子化合物の標的分子(この分子はアポトーシス実行に重要なミトコンドリア分子であると考えられる)の同定を行っているところである。また、この低分子化合物に関しては、個体レベルのアポトーシスにおいて抑制機能を発揮するか検討していく予定である。また、最近我々はBcl-2ファミリー蛋白質に特異的に結合する低分子化合物を見出しており、この分子の立体構造をもとに、アポトーシス促進型Bcl-2ファミリー蛋白質にのみ結合する分子をコンピューター上でデザインし、抗アポトーシス薬の開発を行う。

由于线粒体膜通透性的现象是起点，因此阐明线粒体膜渗透率的机制并将其用作分子靶是有用的。因此，这项研究的目的是1）全面筛选分子涉及增加线粒体膜的通透性，以及2）开发这些发现的基础。我们已经建立了一个体外测定系统，该系统使用分离的线粒体来测量线粒体膜渗透性的程度。在该系统中，（1）肝脏线粒体外膜成分的单克隆抗体（4000个克隆）库，以及（2）添加小分子化合物库以搜索抗体或小分子化合物，以稳定膜的透气化合物。结果，发现了几种类型的抗体和一种小分子化合物。这些抗体和化合物无疑对细胞实验中的凋亡产生了影响。当前，我们正在鉴定这些抗体和小分子化合物的靶分子（该分子被认为是一种线粒体分子，对于进行凋亡很重要）。此外，我们将研究这种低分子量化合物是否会在单个水平的凋亡中表现出抑制作用。此外，我们最近发现了特异性结合Bcl-2家族蛋白的小分子化合物，并基于该分子的三维结构，我们设计了仅在计算机上与促凋亡Bcl-2家族蛋白结合的分子，并且正在开发抗凋亡药物。