がんの発生におけるTGFーβシグナルの役割に関する遺伝子改変マウスを用いた研究

使用转基因小鼠研究 TGF-β 信号在癌症发展中的作用

基本信息

批准号：
18012009
负责人：
加藤光保
金额：
$ 6.02万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18012009/
关键词：
がん TGF-β Smad ephrin-A1 TMEPAI Apc 浸潤幹細胞 Apc^<min +>マウス

项目摘要

消化管粘膜上皮特異的にephrin-A1を過剰発現するトランスジェニックマウスを作製し、Apc^<min/+>マウスと交配して腫瘍の病理学的解析を行ない、Apc^<min/+>マウスに発生する大腸腺腫にephrin-A1の過剰発現が加わると浸潤性腫瘍の発生が著しく亢進することを明らかにした(Shi L et al.Oncogene In press)。また、TMEPAIノックアウトマウスを作製し、Apc^<min/+>マウスとの交配を行なったが、129(ES細胞)由来の遺伝子の混入によりApc^<min/+>マウスに発生する腫瘍数が大きく減少した。そこで、TMEPAIノックアウトマウスのB6バックグラウンドへの戻し交配を行なうとともに、免疫不全マウスを用いた移植腫瘍の形成におけるTMEPAIノックダウンの影響についても検討することを追加計画し実施している。さらにTMEPAIの作用機序にっいての解析を進めるとともに(論文投稿中)、TMEPAI遺伝子の発現制御領域の解析を行ない、TMEPAIはTCF4を介するWntシグナルとSmad3を介するTGF-βシグナルの協調作用によって発現が充進する遺伝子であることを見いだした(投稿準備中)。また、TMEPAI結合タンパク質の網羅的解析を行ない、TMEPAIの新たな標的分子も見いだしている。TGF-β1を消化管粘膜上皮に過剰発現するマウスを新たに作製した。また、Smad4^<f1/f1>マウスとMx-Creマウスを交配しpoly I:Cを投与して誘導的なSmad4のコンデショナルノックアウトを行ない、組織幹細胞を観察する方法を検討しながら、消化管粘膜上皮の幹細胞の動態に及ぼす作用を調べている。

我们生成了在胃肠道粘膜上皮中特异性过度表达肝配蛋白-A1的转基因小鼠，将其与Apc^<min/+>小鼠杂交，并对肿瘤进行病理学分析。我们发现，当将肝配蛋白-A1过度表达添加到结直肠腺瘤中时，发生在结肠中时，侵袭性肿瘤的发展显着增强（Shi L 等人，Oncogene In press）。另外，我们生成了TMEPAI敲除小鼠，并与Apc^<min/+>小鼠杂交，但由于129（ES细胞）来源基因的污染，Apc^<min/+中产生的肿瘤数量> 小鼠明显减少。因此，除了将TMEPAI敲除小鼠与B6背景回交外，我们还计划进行额外的研究，以利用免疫缺陷小鼠来检查TMEPAI敲除对移植肿瘤形成的影响。除了进一步分析TMEPAI的作用机制（论文正在投稿）之外，我们还分析了TMEPAI基因的表达控制区，发现该基因是高表达的（正在准备投稿）。我们还对 TMEPAI 结合蛋白进行了全面分析，发现了 TMEPAI 的新靶分子。我们新培育出在胃肠道粘膜上皮细胞中过度表达 TGF-β1 的小鼠。此外，我们将Smad4^<f1/f1>小鼠与Mx-Cre小鼠杂交，施用poly I:C以进行Smad4的诱导条件敲除，并检查了观察胃肠道中组织干细胞的方法。对粘膜上皮干细胞动力学的影响。