がん細胞がTGF-βの増殖抑制活性に対する応答性を失う責任異常分子の同定

鉴定导致癌细胞失去对 TGF-β 抗增殖活性反应性的异常分子

基本信息

批准号：
09254265
负责人：
加藤光保
金额：
$ 1.6万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

Transforming growth factor-β(TGF-β)は種々の正常細胞の増殖を抑制するが、がん細胞は反応性を消失している場合が多い。本研究は、この増殖抑制シグナルに関与する分子の同定と扁平上皮癌細胞における反応性消失の機序を解明することを目的とし、本年度は以下の点を明らかにした。(1)角化細胞上に発現し増殖抑制に関与するTGF-βレセプターはTβRIとTβRIIである。(2)TGF-β刺激はSmad2とSmad3のリン酸化を誘導する。アクチビンAはTGF-βのファミリー分子だが角化細胞に対する増殖抑制活性は弱い。このアクチビンAでは、主にSamd3がリン酸化され、Smad2のリン酸化の程度は弱く、さらにSmad蛋白の核移行の程度も弱い。(3)大腸癌細胞で見つかったSmad2のミスセンス変異を相同な部位に導入したSmad3D407Eは、増殖抑制シグナルをブロックした。この変異Smad3はTβRIに結合するがリン酸化されずレセプターから解離できないために、共存する野性型のSmad2とSmad3のリン酸化も抑制した。(4)扁平上皮癌細胞株15株でレセプターの欠損株は1株のみであった。また、これらの細胞の多くはSmad2遺伝子にも異常がないことが報告された。しかし、レセプターにもSmad2にも異常が認められない扁平上皮癌細胞株において、TGF-β刺激によるSmad2の核移行が認められず、Smad2の核移行にはレセプターとその直接の基質であるSamd2のみならず、何らかの因子が必要であり、扁平上皮癌においては、この分子に異常をきたしている可能性が示唆された。(5)TGF-βはHaCaTのc-myc遺伝子の発現を抑制したが、この細胞にc-myc遺伝子を強制発現させるとTGF-βによる増殖抑制がかからなくなることから、c-myc発現の低下にいたるシグナル経路が角化細胞の増殖抑制に必須であることが示唆された。(6)角化細胞においてTGF-β刺激で1時間以内に発現が誘導される新規遺伝子を発見した。

转化生长因子-β（TGF-β）可抑制各种正常细胞的增殖，但癌细胞通常会失去其反应性。本研究的目的是鉴定参与这种生长抑制信号的分子，并阐明鳞状细胞癌细胞反应性丧失的机制。今年，我们阐明了以下几点。 (1)角化细胞上表达并参与生长抑制的TGF-β受体是TβRI和TβRII。 (2) TGF-β刺激诱导Smad2和Smad3磷酸化。 Activin A 是 TGF-β 家族的成员，但其对角质形成细胞的抗增殖活性较弱。在该激活素A中，Samd3主要磷酸化，Smad2磷酸化程度较弱，Smad蛋白转位至细胞核的能力也较弱。 (3) Smad3D407E，其中在结肠癌细胞中发现的Smad2的错义突变被引入到同源位点，阻断了生长抑制信号。这种突变体Smad3与TβRI结合，但不被磷酸化，不能与受体解离，因此它也抑制了共存的野生型Smad2和Smad3的磷酸化。 (4)在15个鳞状细胞癌细胞系中，只有一种是受体缺陷的。另据报道，许多这些细胞的 Smad2 基因没有异常。然而，在受体和Smad2均未异常的鳞状细胞癌细胞系中，未观察到TGF-β刺激后Smad2的核转位，只有受体及其直接底物Samd2负责Smad2的核转位。有人认为，某些因素是必需的，并且该分子在鳞状细胞癌中可能是异常的。 (5) TGF-β抑制HaCaT中c-myc基因的表达，但当c-myc基因在这些细胞中被迫表达时，TGF-β的生长抑制作用不再起作用，因此c-myc表达表明导致减少的信号通路对于抑制角质形成细胞增殖至关重要。 (6)我们发现了一种新基因，其表达在角质形成细胞中受到TGF-β刺激后1小时内被诱导表达。