Live imaging and counting system of stemness induction and cellular kinetics during persistent growth of cancer cells

癌细胞持续生长过程中干性诱导和细胞动力学的实时成像和计数系统

基本信息

批准号：
20K20597
负责人：
加藤光保
金额：
$ 16.64万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Pioneering)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-07-30 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

1. GPNMB、PMEPA1/TMEPAI、TSC22 Homologous Gene-1 (THG-1)などの遺伝子のノックアウトまたはノックダウンによって、幹細胞遺伝子の発現誘導が失われ、これと共にスフェアや腫瘍形性能が失われることを示した。最初、トリプルネガティブ乳癌細胞を用いて発見したGPNMBとPMEPA1/TMEPAIによるこの現象は、膵癌細胞でも同様の結果となることを確認した。GPNMBのノックアウト細胞は樹立できず、GPNMBは、がん細胞のコロニー形成性増殖に必須であることが示唆された。2. ヒト喉頭がん組織においては、GPNMBの発現が高い細胞は、Ki-67陰性の増殖が停止している細胞であることを示した。ヒト喉頭がんでもGPNMBは、増殖が停止している癌細胞で発現し、悪性化に関与していることがパブリックデータベースにおける予後解析で示された。3. GPNMBは特殊な翻訳後就職を受け、この領域がリガンド分子の結合部位となり、細胞表面に移行すると受容体として機能して、幹細胞誘導に関与する機構を示した。また、GPNMBの機能には、増殖因子のシグナルによる細胞内ドメインのhemITAMのチロシンのリン酸化と共にセリンのリン酸化も必要であることを示した。4. 遺伝子導入を行なっていない患者由来がん細胞のオルガノイド培養のライブイメージングで、GPNMBに結合する特殊環状ペプチドを用いたがん幹細胞の検出を行い、GPNMBを標的とする抗体の作製を行った。5. MKI67-Red eNLを発現する乳がん細胞の作製を行った。

1. 我们发现，GPNMB、PMEPA1/TMEPAI 和 TSC22 同源基因 1 (THG-1) 等基因的敲除或敲除会导致干细胞基因表达诱导的丧失，并随之导致球体和肿瘤形状的丧失性能。这种由 GPNMB 和 PMEPA1/TMEPAI 引起的现象首次在三阴性乳腺癌细胞中发现，并被证实在胰腺癌细胞中也有类似的结果。无法建立 GPNMB 敲除细胞，这表明 GPNMB 对于癌细胞的集落形成生长至关重要。 2.在人喉癌组织中，GPNMB高表达的细胞为Ki-67阴性且生长停滞的细胞。在人类喉癌中，GPNMB 在已停止生长的癌细胞中表达，公共数据库中的预后分析表明它参与恶性转化。 3. GPNMB经历特殊的翻译后功能，该区域成为配体分子的结合位点，当转移到细胞表面时，它充当受体，展示了参与干细胞诱导的机制。我们还表明，GPNMB 的功能需要通过生长因子信号在细胞内域中对 hemITAM 进行酪氨酸磷酸化和丝氨酸磷酸化。 4. 使用与 GPNMB 结合的特殊环肽，通过对未进行基因转移的患者来源的癌细胞的类器官培养物进行实时成像来检测癌症干细胞，并创建了针对 GPNMB 的抗体。 5.产生表达MKI67-Red eNL的乳腺癌细胞。

项目成果

期刊论文数量（12）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Polyvinyl alcohol scaffolds and supplementation support 3D and sphere culturing of human cancer cell lines by reducing apoptosis and promoting cellular proliferation

聚乙烯醇支架和补充剂通过减少细胞凋亡和促进细胞增殖支持人类癌细胞系的 3D 和球形培养

DOI：
10.1111/gtc.12843
发表时间：
2021
期刊：
Genes to Cells
影响因子：
2.1
作者：
Okita Yukari;Zheng Ling;Kawanishi Kunio;Miyoshi Hirotoshi;Yanagihara Kazuyoshi;Kato Mitsuyasu
通讯作者：
Kato Mitsuyasu

TGF-β-Induced TMEPAI Promotes Epithelial-Mesenchymal Transition in Doxorubicin-Treated Triple-Negative Breast Cancer Cells via SMAD3 and PI3K/AKT Pathway Alteration.

DOI：
10.2147/bctt.s325429
发表时间：
2021
期刊：
Breast cancer (Dove Medical Press)
影响因子：
0
作者：
Wardhani BWK;Louisa M;Watanabe Y;Setiabudy R;Kato M
通讯作者：
Kato M

幹細胞性誘導が、がん細胞の持続的な増加をもたらす

干细胞诱导导致癌细胞持续增加

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

トランスボーダー医学研究センター統合医科学部門細胞動態科学分野

跨境医学研究中心、中西医结合医学系、细胞动力学科学系

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

TGFβ selects for pro-stemness over pro-invasive phenotypes during cancer cell epithelial-mesenchymal transition.

DOI：
10.1002/1878-0261.13215
发表时间：
2022-06
期刊：
MOLECULAR ONCOLOGY
影响因子：
6.6
作者：
Tsubakihara, Yutaro;Ohata, Yae;Okita, Yukari;Younis, Shady;Eriksson, Jens;Sellin, Mikael E.;Ren, Jiang;Ten Dijke, Peter;Miyazono, Kohei;Hikita, Atsuhiko;Imamura, Takeshi;Kato, Mitsuyasu;Heldin, Carl-Henrik;Moustakas, Aristidis
通讯作者：
Moustakas, Aristidis