がんの進展に関わるTGF・βの標的遺伝子に関する遺伝子改変マウスを用いた研究

使用转基因小鼠研究参与癌症进展的 TGF/β 靶基因

基本信息

批准号：
17013019
负责人：
加藤光保
金额：
$ 3.65万
依托单位：
University of Tsukuba
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

消化管上皮と尿路上皮で特異的に導入遺伝子が発現されるephrin-A1のトランスジェニックマウスとApc^<min>マウスとの交配実験を行った。ephrin-A1(EFNA1)の発現亢進は、Apc^<min>マウスに発生する腺腫において、腺腫細胞の絨毛部から腺窩部への下方進展の促進と腫瘍間質の活性化作用があることが示された。また、ephrin-A1、優勢抑制型TGF-βII型受容体につづき、恒常活性型TGF-β1を消化管上皮に発現するトランスジェニックマウスも作製した。腫瘍の発生と進展に関与しうるTGF-βシグナルの関連分子として、新たにELAC2を同定した。ELAC2はN末端領域でSmadと結合し、SmadとSp1やFOXH1との結合性を増強することで、TGF-βシグナルによる標的遺伝子の転写を活性化する作用をもつことが判明した。遺伝子ノックダウン法を用いて、ELAC2の発現を抑制すると、TGF-βによるp21の発現亢進作用が低下し、増殖抑制作用も低下した。また、TMEPAI(PMEPA1)がTGF-βシグナルによって誘導され、R-Smadをトラップすることで、I-Smadと同様にTGF-βシグナルにネガティブフィードバック作用を示すことを明らかにした。現在、この分子のノックアウトマウスの作製を開始している。さらに、薬物代謝の第2相酵素群や第3相のチャンネル分子ならびに抗酸化分子等の発現誘導に中心的な役割を果たすNrf2もTGF-βシグナルの標的となっていることを発見した。現在、この作用機序の解析も進めている。

我们在ephrin-A1转基因小鼠和Apc^<min>小鼠之间进行了杂交实验，其中引入的基因在胃肠道上皮和尿路上皮中特异性表达。肝配蛋白-A1 (EFNA1) 表达的增加已被证明可促进腺瘤细胞从绒毛向下进展至隐窝，并激活 Apc^<min> 小鼠中发育的腺瘤中的肿瘤基质。我们还培育了在胃肠道上皮细胞中表达肝配蛋白-A1（一种显性抑制性 TGF-β II 型受体）和组成型活性 TGF-β1 的转基因小鼠。我们新发现 ELAC2 是一种与 TGF-β 信号传导相关的分子，可能参与肿瘤的发生和进展。研究发现ELAC2在其N端区域与Smads结合，并增强Smads与Sp1和FOXH1的结合，从而通过TGF-β信号激活靶基因的转录。当使用基因敲低方法抑制ELAC2的表达时，TGF-β增强p21表达的作用减弱，生长抑制作用也减弱。我们还发现TMEPAI (PMEPA1)由TGF-β信号诱导并捕获R-Smads，从而对TGF-β信号表现出类似于I-Smads的负反馈作用。我们目前正在开始创建该分子的基因敲除小鼠。此外，我们发现Nrf2在诱导药物代谢2相酶、3相通道分子和抗氧化分子的表达中起核心作用，也是TGF-β信号的靶标。我们目前正在分析这种作用机制。