Analysis of immunosuppressive mechanism by Mesocestoides vogae and its excretory-secretory products

沃格中绦虫及其排泄物的免疫抑制机制分析

基本信息

批准号：
21K06998
负责人：
森田健太郎
金额：
$ 2.66万
依托单位：
University of Occupational and Environmental Health, Japan
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ネズミ中殖条虫（Mesocestoides vogae；Mv）を用い、Th17型の自己免疫疾患モデルであるマウスコラーゲン関節炎（CIA）に対する抑制機構の解明に取り組んでいる。CIAはウシⅡ型コラーゲン（ⅡC）を完全フロイトアジュバントと混合しエマルジョンの状態でDBA/1マウスの背部に皮内免疫することで誘導する。また、Mv感染は免疫1週間後に腹腔内投与により行う。その後、免疫3～8週後まで関節炎を経時的に評価し、評価終了後は血清や脾臓細胞を回収する。今年度は、2021年度得られた野生型マウスの免疫学的変化に関するデータの再現性実験を行った。その結果、抗CD3抗体刺激により脾臓細胞から培養上清中に分泌されるサイトカインにおいて関節炎促進性サイトカインTNF-αの産生抑制がMv感染群でみられ、また関節炎抑制性サイトカインIFN-γの産生抑制もみられた。さらに、脾臓細胞のフローサイトメトリー解析においては蠕虫感染特有の好酸球の増加が顕著にみられ、また、骨髄由来免疫抑制細胞（MDSC）においては、顆粒球型MDSC（PMN-MDSC：CD11b+Ly6G+Ly6Clow）および単球型MDSC（M-MDSC：CD11b+Ly6G-Ly6Chigh）共に増加がみられた。また、血清中の抗ⅡC抗体においては分泌抑制がみられ、脾臓細胞中のB細胞の減少もみられた。以上より、昨年度に得られた野生型マウスのデータは再現性あるものと確認できた。さらに、研究実施計画に基づいてIL-5欠損マウスを用いて上記同様の実験を行い、好酸球のCIA抑制機構への関与を検討した。その結果、Mv感染によるCIAの抑制作用は解除されず、野生型マウスと同様の結果となった。つまり、好酸球はMv感染により増大するものの、CIAの抑制機構への関与は低いことが示唆された。

我们正在利用小鼠中绦虫 (Mv) 来阐明小鼠胶原关节炎 (CIA)（一种 Th17 自身免疫性疾病模型）的抑制机制。 CIA 是通过以牛 II 型胶原 (IIC) 与完全弗洛伊德佐剂混合的乳液形式对 DBA/1 小鼠背部进行皮内免疫来诱导的。另外，Mv感染是在免疫后1周通过腹腔内给药进行的。此后，在免疫后3至8周的一段时间内评估关节炎，并在评估后收集血清和脾细胞。今年，我们对2021年获得的野生型小鼠免疫学变化数据进行了重现性实验。结果，在抗CD3抗体刺激后从脾细胞分泌到培养上清液中的细胞因子中，Mv感染组中促关节炎细胞因子TNF-α的产生受到抑制，并且关节炎抑制细胞因子TNF-α的产生受到抑制。还观察到细胞因子IFN-γ被抑制。此外，脾细胞的流式细胞术分析显示嗜酸性粒细胞显着增加，这是蠕虫感染的特征，并且在骨髓源性免疫抑制细胞（MDSC）、粒细胞MDSC（PMN-MDSC：CD11b+和Ly6G+中均观察到增加） Ly6Clow) 和单核细胞 MDSC (M-MDSC: CD11b+Ly6G-Ly6Chigh)。此外，观察到血清中抗IIC抗体的分泌受到抑制，并且还观察到脾细胞中的B细胞减少。综上所述，证实去年获得的野生型小鼠的数据是可重复的。此外，根据研究实施计划，我们使用IL-5缺陷小鼠进行了与上述类似的实验，以检查嗜酸性粒细胞在CIA抑制机制中的参与。结果，CIA因Mv感染而产生的抑制作用并未缓解，结果与野生型小鼠相似。换句话说，尽管嗜酸性粒细胞因Mv感染而增加，但表明它们对CIA抑制机制的参与程度较低。