病的構造タンパク質(アミロイド線維)の伝播及び形成機構の解析

病理结构蛋白（淀粉样原纤维）的增殖和形成机制分析

• 批准号: 17028018
• 负责人: 樋口 京一
• 金额: $ 4.22万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17028018/
• 关键词: タンパク質; 動物; アミロイド; 線維構造; 伝播; マウス; apoA-II; プリオン; アミロイドーシス; AApoAII; モデルマウス; 線維形成; 合成ペプチド; クロストーク

アミロイドーシスは生理的機能を持つタンパク質が構造変換を受け、アミロイド線維に重合・沈着し生体に障害を与える『タンパク質ホールディング病』の総称である。我々は『異常構造プリオンの伝播』と類似した『アミロイド線維の伝播』がアミロイドーシス発症の重要な要因であることを示してきた。タンパク質の一生の中で、★アミロイド線維形成と生体への沈着、★アミロイド線維様物質の伝播による外部への発症拡大というアミロイドタンパク質の破綻的後半生の実態を明らかにするために以下の研究を行った。1)伝播におけるアミロイド線維間クロストーク:モデルマウスを用いてAApoAIIとAAアミロイド線維間での、同種モノマーの線維伸長促進効果、異種のモノマーの線維形成阻害及び線維分解効果を解析し、Self-seeding, Cross-seeding, Cross-competitionの優劣でアミロイド沈着が動的に変異する概念を提唱した。2)チーターにおけるAAアミロイドーシスの伝播の解析:絶滅危惧種であるチーターは動物園等での飼育・繁殖が行われている。飼育チーターの主要死因はAAアミロイドーシスで、早急な対策が求められている。チーターのAAアミロイド線維を精製し、抗体作成、一次構造決定、遺伝子クローニング等を行った。糞中から分取したAAアミロイド線維がマウスAAアミロイドーシスを誘発することを明らかにし、糞を介した飼育集団下でのAAアミロイドーシス伝播の可能性を示した。3)試験管内でのアミロイド線維形成機構の解析:ApoA-II(78アミノ酸)の合成部分ペプチドを用いて線維形成のメカニズムと伝播について解析した。C末近傍(48-65)とN末(1-16)の2つのペプチドが関与するユニークな線維形成機構を明らかにし、線維形成条件(pH,添加物質)を変え、生体で形成された線維と同等の伝播力を示す線維の形成を試みた。

淀粉样变性是“蛋白质持有疾病”的一般术语，它导致生理蛋白质经历结构转化，并在淀粉样蛋白纤维上进行聚合和沉积，从而损害生物体。我们已经表明，类似于“异常结构王室的传播”的“淀粉样纤维的传播”是淀粉样变性发展的重要因素。进行了以下研究，以阐明淀粉样蛋白的后半部分的当前状态，包括淀粉样蛋白原纤维的形成和生物中的沉积，以及由于淀粉样蛋白纤维纤维的扩散而导致的淀粉样蛋白原纤维的传播引起的淀粉样蛋白原纤维的传播。 1）在繁殖过程中淀粉样纤维之间的串扰：我们分析了同种异体单体对AAPOAII和AA淀粉样蛋白纤维之间纤维纤维纤维扩展，抑制纤维纤维的抑制和纤维蛋白效应的影响交叉竞争。 2）分析猎豹AA淀粉样变性的传播：一种受威胁的物种Cheetah在动物园和其他地方被保存和复制。饲养猎豹的死亡主要原因是AA淀粉样变性，需要采取紧急措施。纯化猎豹AA淀粉样蛋白纤维，制备抗体，一级结构测定，基因克隆等。我们透露，与粪便分离的AA淀粉样蛋白纤维诱导了AA淀粉样变性，表明粪便介导的育种群体中AA淀粉样变性的可能性。 3）分析体外淀粉样蛋白原纤维形成的机理：使用ApoA-II的合成部分肽（78个氨基酸）分析了原纤维形成和传播的机理。我们揭示了一种独特的纤维化形成机制，涉及两种肽，即在C末端（48-65）和N末端（1-16）附近，并改变了形成纤维化的形成条件（pH，添加剂物质），并试图形成与在生物体中形成的纤维相似的纤维。

项目成果

Cross-seeding and cross-competition in mouse apolipoprotein A-II amyloid fibrils (AApoAII) and protein A amyloid fibrils (AA).

小鼠载脂蛋白 A-II 淀粉样原纤维 (AApoAII) 和蛋白 A 淀粉样原纤维 (AA) 的交叉播种和交叉竞争。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Am J Pathol (in press)
• 作者: Yan J;Fu X;Ge F;Zhang B;Yao J;Zhang H;Qian J;Tomozawa H;Naiki H;Sawashita J;Mori M;Higuchi K.
• 通讯作者: Higuchi K.

アミロイドーシスの伝播

淀粉样变性的传播

• 发表时间: 2007
• 期刊: 細胞工学 26・2
• 作者: Ge F;Yao J;Fu X;Guo Z;Yan J;Zhang B;Zhang H;Tomozawa H;Miyazaki J;Sawashita J;Mori M;Higuchi K.;樋口京一
• 通讯作者: 樋口京一

アミロイドーシスの基礎と臨床(2-5,アミロイドーシスと伝播、3-7,マウス老化アミロイドーシス)

淀粉样变性的基础知识和临床实践（2-5，淀粉样变性和传播，3-7，小鼠衰老淀粉样变性）

• 发表时间: 2005
• 作者: 監修:石原得博;編集:池田修一;著者:樋口京一
• 通讯作者: 著者:樋口京一

Transmissibility of mouse AApoAII amyloid fibrils : inactivation by physical and chemical methods.

小鼠 AApoAII 淀粉样原纤维的传播性：通过物理和化学方法灭活。

• 发表时间: 2006
• 期刊: FASEB J 20・7
• 作者: Zhang H;Sawashita J;Fu X;Korenaga T;Yan J;Mori M;Higuchi K
• 通讯作者: Higuchi K