病的構造タンパク質(アミロイド線維)の伝播及び形成機構の解析

病理结构蛋白（淀粉样原纤维）的增殖和形成机制分析

• 批准号: 15032217
• 负责人: 樋口 京一
• 金额: $ 4.99万
• 依托单位: Shinshu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15032217/
• 关键词: アミロイドーシス; 伝播; マウス; トランスジェニックマウス; 線維形成; apoA-II; 透析アミロイドーシス; 家族性アミロイドポリニューロパチ(FAP); タンパク質間相互作用; モデルマウス; アミロイド線維; 線維形成反応; 合成ペプチド; 構造異常

アミロイドーシスは本来生理的機能を持つタンパク質が構造変換を受け、微細な線維(アミロイド線維)に重合・沈着し生体に障害を与える『タンパク質のホールディング病』の一群の疾患の総称である。我々はこれまでAApoAIIアミロイドーシスのモデルマウスを用いて,アミロイド線維(Seed)によるアミロイド線維伸長反応促進がアミロイドーシス発症に重要な役割を担っていることを示してきた(アミロイドーシスの伝播)。このようなアミロイド線維による伝播に関して以下のような新たな研究成果を得た。1)家族性アミロイドポリニューロパチー(FAP)モデルマウス(hMet30TTR Tg^+,mTtr^<KO/KO>)にアミロイド線維(ATTR)を経口投与すると投与後18ヶ月以降にAApoAIIの沈着が認められ、同時にATTRの沈着も観察された。2)透析アミロイドーシスのモデル動物としてヒトβ2ミクログロブリントランスジェニックマウス(hB2M Tg^+, mB2m^<KO/KO>)を作成し、血清ミクログロブリン濃度が患者血清の数倍にまで達することが確認された。3)AApoAIIとAAアミロイドタンパク質及び線維間での相互作用(Cross-seeding)がin vivoで観察された。4)マウスAApoAIIタンパク質の部分的合成ポリペプチドを用いて、アミロイド線維形成にはN末端の無構造領域とC末端付近のβシート構造領域の両方が必要であることが明らかになった。5)AApoAIIアミロイド線維の伝播力の解析から、アミロイド線維構造が伝播に最も重要であることが示唆された。6)アミロイド原性の高いApoa2^c遺伝子のトランスジェニックマウス(mApoa2^cTg^+,Apoa2^<c/c>)を作成した。これまで利用してきたP1.R1-Apoa2^cマウスよりはるかに迅速なアミロイド沈着を観察した。

淀粉样变性是一组“蛋白质折叠疾病”的总称，其中原本具有生理功能的蛋白质发生结构变化，聚合并沉积成微小纤维（淀粉样原纤维），并对生物体造成损害。使用AApoAII淀粉样变性小鼠模型，我们发现淀粉样蛋白原纤维（种子）促进淀粉样蛋白原纤维伸长在淀粉样变性的发展（淀粉样变性的传播）中发挥重要作用。我们获得了以下关于淀粉样原纤维传播的新研究结果。 1）给家族性淀粉样多发性神经病（FAP）模型小鼠（hMet30TTR Tg^+,mTtr^<KO/KO>）口服淀粉样原纤维（ATTR）时，给药18个月后观察到AApoAII沉积，同时ATTR还观察到沉积。 2）建立人β2微球蛋白转基因小鼠（hB2M Tg^+、mB2m^<KO/KO>）作为透析淀粉样变性模型动物，证实其血清微球蛋白浓度达到患者血清的数倍。 3)在体内观察到AApoAII与AA淀粉样蛋白和原纤维之间的交叉播种。 4)使用小鼠AApoAII蛋白的部分合成多肽，发现N端非结构区和C端β-折叠结构区都是淀粉样原纤维形成所必需的。 5)对AApoAII淀粉样蛋白原纤维的增殖力的分析表明淀粉样蛋白原纤维结构对于增殖最为重要。 6) 我们创建了具有高度淀粉样蛋白生成 Apoa2^c 基因的转基因小鼠 (mApoa2^cTg^+, Apoa2^<c/c>)。我们观察到淀粉样蛋白沉积比我们迄今为止使用的 P1.R1-Apoa2^c 小鼠要快得多。

项目成果

老化アミロイドーシス

老年淀粉样变性

• 发表时间: 2004
• 期刊: 基礎老化研究 28(4)
• 作者: 樋口京一;付笑影
• 通讯作者: 付笑影

Mouse testis transcriptome revealed using serial analysis of gene expression

• DOI: 10.1007/s00335-004-2347-7
• 发表时间: 2004-06
• 期刊: Mammalian Genome
• 影响因子: 2.5
• 作者: Junjie Yao;T. Chiba;J. Sakai;K. Hirose;Mikio Yamamoto;A. Hada;K. Kuramoto;K. Higuchi;M. Mori

Korenaga T, Fu X, Xing Y, Matsusita T, Kuramoto K, Syumiya S, Hasegawa Z, Naiki H, Ueno M, Ishihara T, Hosokawa M, Mori M, Higuchi K.: "Tissue distribution, biochemical properties and transmission of mouse type a AApoAII amyloid fibrils."American Journal

Korenaga T，Fu X，Xing Y，Matsusita T，Kuramoto K，Syumiya S，Hasekawa Z，Naiki H，Ueno M，Ishihara T，Hosokawa M，Mori M，Higuchi K.：“小鼠的组织分布、生化特性和传播

Guo Z, Mori M, Fu X, Yao J, Xing Y, Korenaga T, Li G, Matsushita T, Hosokawa M, Higuchi K.: "Amyloidosis modifier genes in less amyloidogenic All mouse strain."Laboratory Investigation. 83. 1605-1613 (2003)

Guo Z、Mori M、Fu X、Yao J、Xing Y、Korenaga T、Li G、Matsushita T、Hosokawa M、Higuchi K.：“淀粉样变性较少的所有小鼠品系中的淀粉样变修饰基因。”实验室研究。

Deposition of transthyretin amyloid is not accelerated by the same amyloid in vivo.

体内相同的淀粉样蛋白不会加速转甲状腺素蛋白淀粉样蛋白的沉积。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Amyloid : J Protein Folding Disord 11
• 作者: Wei L;Kawano H;Fu X;Cui D;Ito S;Yamamura K;Ishihara T;Tokuda T;Higuchi K;Maeda S
• 通讯作者: Maeda S