骨粗鬆症モデルマウス(SAMP6)を用いた骨量決定遺伝子群の同定

使用骨质疏松模型小鼠 (SAMP6) 鉴定骨量决定基因

基本信息

批准号：
15012223
负责人：
樋口京一
金额：
$ 3.46万
依托单位：
Shinshu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

SAMP6の3つの低骨量原因遺伝子(Pbd1,Pbd2,Pbd3)の同定と機能解析を行うため、SAMP6とSAMP2による第11,13,X染色体3領域のcongenicマウス作成が終了し、骨量決定遺伝子の効果を確認し,機能解析を行った。第11染色体(Pbd1)に関してはsub-congenic系統の解析により、12cM(9Mbp)まで領域を絞り込んだ。更なる領域の絞り込みを目指してsub-subcongenic 10系統を作製中である。マイクロアレイ解析、sub-congenicマウスの解析、SAMP6、SAMP2及び他のマウス系統のSNP解析により、第11番染色体上の1つの候補遺伝子を同定(Ifp35)した。Ifp35の骨量調節機能解析のため、SAMP6と同じhaplotypeであるC57/BLをベースにしたtransgenic mouseが完成し、現在骨密度測定中である。第13番染色体(Pbd2)に関しては、sub-congenic5系統を用いて絞り込んだPbd2の存在領域内127遺伝子の全エクソンの塩基配列解析を行い、約2cMの領域に74個の候補遺伝子が存在することを示した。この内、アミノ酸置換を生じるSNPsが15遺伝子で発見された。現在、sub-subcongenic系統を3系統作製中であり、更なる領域の絞り込みを行っている。また、congenic mouseを用いて上記遺伝子の発現量を調査している。X染色体(Pbd3)に関してはSAMP2にSAMP6のPdb3を導入したcongenic系統は退行期での骨密度減少が抑制された。さらにこのcongenic系統の骨吸収マーカーは低く、low turnoverであることが示唆され、Pbd3は退行期のbone turnoverを制御している遺伝子である可能性が示唆された。

为了鉴定和功能分析负责低骨量的三个SAMP6基因（Pbd1、Pbd2、Pbd3），我们利用SAMP6和SAMP2完成了第11、13和X染色体3区域的同系小鼠的创建，我们确认其有效性并进行了功能分析。关于 11 号染色体 (Pbd1)，我们通过分析亚同类菌株将区域缩小到 12 cM (9 Mbp)。我们目前正在创建 10 条次亚同源系以进一步缩小范围。通过微阵列分析、亚同类小鼠分析以及SAMP6、SAMP2和其他小鼠品系的SNP分析，我们在11号染色体上鉴定了一个候选基因（Ifp35）。为了分析Ifp35的骨量调节功能，我们完成了基于与SAMP6相同单倍型C57/BL的转基因小鼠，目前正在测量骨密度。对于13号染色体（Pbd2），我们使用5个亚同源株对Pbd2区域内的127个基因的所有外显子进行了核苷酸序列分析，发现在大约2cM的区域中存在74个候选基因。其中，在15个基因中发现了引起氨基酸取代的SNP。目前，我们正在创建三个亚亚同源系，并正在进一步缩小区域范围。我们还在利用同系小鼠研究上述基因的表达水平。关于X染色体(Pbd3)，将SAMP6的Pdb3导入SAMP2的同系系抑制了复旧期骨密度的降低。此外，该同源系具有较低的骨吸收标记，表明周转率较低，表明 Pbd3 可能是在退行性阶段控制骨周转的基因。