NMDA受容体のリン酸化に伴う神経可塑性に関与する機能分子の探索

寻找参与与 NMDA 受体磷酸化相关的神经可塑性的功能分子

基本信息

批准号：
17024053
负责人：
伊藤誠二
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kansai Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

NMDA受容体NR2A、NR2Dをはじめとするさまざまなノックアウトマウスに神経因性疼痛モデルを作製し、疼痛行動を解析した結果、FynキナーゼによるNMDA受容体NR2BサブユニットのTyr1472のリン酸化とnNOSの細胞質から細胞膜へのトランスロケーションがnNOSの活性化と神経因性疼痛の維持に必要であることがわかった。NR2Bサブユニットは長い細胞内部分のC末端にPDZ結合モチーフESDVとその近傍にインターナリゼーションシグナルYEKLをもち、後者に含まれるY(=Tyr1472)のリン酸化は、NR2Bサブユニットを後シナプス肥厚(PSD)に留めることとnNOSの活性化、すなわちシナプス終末からの情報の「受容の場」と「シグナル変換」の2つの機能に関与することを明らかにした。NR2BサブユニットのC末端の重要性を明らかにするためTyr1472をPheに置換したノックインマウスNR2BY1472Fで行動解析を行い、神経因性疼痛が生じないことを確認した。nNOSはN末端のPDZ domainに続くoxygenase、dehydrogenase domainから成り立っている。nNOSのトランスロケーション機構を明らかにするために、nNOSのPDZ-GFPを培養細胞にトランスフェクションする系を確立して解析を進めている。さらに、NR2BのTyr1472のリン酸化による機能分子の探索を行うために、Ettan-DIGE二次元電気泳動に用いるサンプルを調製するために、野生型マウスとNR2BY1472Fノックインマウスからサンブルを調製すべく、1000匹を目標に繁殖を進めている。

NMDA受体NR2A，NR2D，包括NR2D和其他敲除小鼠，并分析了细胞膜上的疼痛行为。 NR2B亚基具有PDZ结合基序ESDV，并且在长细胞的长细胞中具有内在化信号YEKL，而后者（= Tyr1472）是NR2B亚基。，“ psd）和“ nnos的激活”，即从突触结束的信息的“接受位置”和“信号转换”。为了阐明NR2B亚基的C末端的重要性，对敲击-in小鼠NR2BY1472F进行了行为分析，后者用PHE代替了Tyr1472，并确认没有发生神经可口的疼痛。 NNOS遵循N端PDZ结构域，由氧酶，脱氢酶结构域组成。为了阐明NNOS传输机制，正在通过建立转染系统以在NNOS PDZ-GFP中进行转染来进行分析。此外，为了通过Tyr1472的NR2B磷酸化探索功能分子，1000只动物准备野生小鼠和NR2BY1472F敲门小鼠，以准备用于Ettan-Dige二维电气游泳的样品。