脊髄における神経可塑性モデル、アロディニアの発症機構

脊髓神经可塑性模型，异常性疼痛发作的机制

基本信息

批准号：
12053263
负责人：
伊藤誠二
金额：
$ 38.53万
依托单位：
Kansai Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

最近のDNAマイクロアレイの実験では、神経損傷に伴い100以上の遺伝子発現が変化することが報告されているが、どのように疼痛反応に関与するかは不明であった。今年度はPACAP(pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide)のノックアウト(PACAP^<-/->マウスを用いて検討を行った。神経損傷に伴いPACAPの発現がDRGの中型・大型細胞、脊髄後角の浅層で増加するが、PACAP^<-/->マウスでは見られなかった。痛覚伝達にはグルタミン酸NMDA受容体が重要であり、その活性化に伴い一酸化窒素(NO)の産生が増加する。神経型一酸化窒素合成酵素(nNOS)活性は組織を固定後、NADPHジアホラーゼ活性で組織染色して測定できる。神経損傷後、NADPHジアホラーゼ活性がPACAPの発現誘導部位に一致して増加していたが、PACAP^<-/->マウスでみられなかった。NADPHジアホラーゼがnNOSの活性化を反映しているかどうか確認するために、蛍光NO指示薬DAF-FMを用いてNO産生を検討した。脊髄スライスにNMDAあるいはPACAPを単独投与した場合にはNO産生がみられなかったが、NMDA存在下にPACAPは濃度依存的にNO産生を増加させた。PACAP^<-/->マウスでNMDAとPACAPが相乗的に作用してアロディニアを誘発することから、疼痛行動とNO産生との関連が確認された。さらに、培養細胞を用いてNMDAとPACAPでnNOSの細胞質から細胞膜へのトランスロケーションが引き起こされ、NO産生が上昇することが示された。nNOSは後シナプス膜肥厚(PSD)においてPSD-95を介してNMDA受容体と会合することが知られている。現在、神経因性疼痛に伴うNMDA受容体複合体の構成分子の変化をプロテオミクスで解析を進めている。

最近的DNA微射线报告说，由于神经损伤，有100多个基因表达发生了变化，但疼痛涉及的疼痛是未知的。今年，我检查了垂体腺苷酸环化酶 - 艾维丁（pacap^< - / - >小鼠。谷氨酸的产生很重要，但是，在固定组织（NNOS）活性后，没有氧化物的产生（NO）在PACAP^< - /->中没有发现NADPH GIA马是否被激活。共享和诱导的Alodinia，NMDA和PACAP的重定位是由培养细胞培养细胞对细胞膜的培养细胞引起的，现在众所周知，NNOS现在与Sinaps肥大中的NMDA受体有关（PSD）受体复合物的组成分子的变化。