がん細胞のRas依存的non-apoptoticプログラム細胞死
癌细胞依赖Ras的非凋亡性程序性细胞死亡
基本信息
- 批准号:17014009
- 负责人:
- 金额:$ 3.39万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2005
- 资助国家:日本
- 起止时间:2005 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
我々はがんで特徴的に見られるRasの異常活性化により惹起されるnon-apoptoticプログラム細胞死の存在を初めて発見し、このような細胞死が実際に生体内で(Rasが異常活性化した)がん細胞の排除機構として機能していることを明らかにした。そこで現在このがん細胞のRas依存的non-apoptoticプログラム細胞死のin vitroモデル実験系を用いてその制御機構の解明を進めており、本年度(本研究課題)では従来から行ってきた細胞内活性分子の刺激薬・阻害薬を用いたスクリーニングの継続ならびにsiRNA発現ライブラリーを用いたゲノム・ワイドスクリーニングという新規方法論による細胞死制御因子の同定を試みた。細胞内活性分子の刺激薬・阻害薬のスクリーニングの過程ではcyclic AMPがRas依存的non-apoptoticプログラム細胞死の制御に関わっている可能性が明らかになってきた。また、Ras依存的non-apoptotic細胞死に対する感受性と細胞内cyclic AMPレベルの関係を調べてみたところ、細胞死感受性と細胞内レベルが相関する傾向が認められた。今後はこれらの所見の確認を進める予定である。またsiRNA発現ライブラリースクリーニングに関してはスクリーニングを実施するための準備(必要なマテリアルの作成や条件設定)を行った。特に本実験では生存細胞を選択的に回収する必要があり、これをflow cytometricに行うため緑色傾向蛋白質(GFP)でラベルしたRas蛋白質(GFP-Ras)を発現する発現ベクターを作成した。GFP-Ras発現ベクターとコントロールGFP発現ベクターを細胞内に導入した後flow cytometric analysisを行い、生存細胞と死細胞を分取するためのパラメータの選択、条件設定を行った。今後これらのマテリアル・条件を用いてスクリーニングを行う予定である。
我们首先发现了由于癌症中RA的异常激活而引起的非凋亡程序细胞死亡,而这种细胞死亡实际上在生物体内(RAS是异常)。 。因此,我们目前正在使用该癌细胞的RAS依赖性非凋亡程序死亡的体外模型实验系统阐明控制机制,并且在今年(本研究问题),自从过去就进行了细胞内部活动。在筛选细胞内活化分子分子的兴奋剂和抑制剂时,很明显,环状AMP参与控制RAS依赖性非凋亡程序死亡的控制。检查对RAS依赖性非凋亡细胞死亡的敏感性与细胞内循环AMP水平之间的关系,细胞死亡灵敏度与细胞内水平之间的趋势往往相关。将来,我们计划确认这些发现。关于siRNA表达式库筛选,我们准备筛选(创建和设置必要的材料和设置条件)。特别是,在本实验中,需要选择性地收集生存细胞,并表达用绿色趋势蛋白(GFP)标记的RAS蛋白(GFP-RAS)的表达载体在流式细胞仪中执行此量。在细胞中引入GFP-RAS表达载体和控制GFP表达载体后,进行了流式细胞仪分析,以选择和设置参数,以分布存活的细胞和死细胞。将来,我们计划使用这些材料和条件进行筛选。
项目成果
期刊论文数量(3)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Non-apoptotic programmed cell deaths: existence and significance of programme cell deaths having morphology and mechanism distinct from apoptosis.
非凋亡程序性细胞死亡:具有与细胞凋亡不同的形态和机制的程序性细胞死亡的存在和意义。
- DOI:
- 发表时间:2005
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:Kurihara A;Nagoshi H;Yabuki M;Okuyama R;Obinata M;Ikawa S.;Kitanaka C
- 通讯作者:Kitanaka C
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北中 千史其他文献
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
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三戸太郎ら
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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- DOI:
- 发表时间:
2006 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
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大内淑代
器官形成とFGF10シグナル,特集FGFシグナル
器官形成和FGF10信号,特殊FGF信号
- DOI:
- 发表时间:
2006 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
Sunayama J;et al.;Sunayama et al.;北中 千史;北中 千史;Tao et al.;Yokohama-Tamaki et al.;大内淑代;Mito et al.;Tao et al.;Yokohama-Tamaki et al.;Mito et al.;Tao et al.;大内淑代 - 通讯作者:
大内淑代
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- DOI:
- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
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Mito et al.
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07274272 - 财政年份:1995
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