高発癌遺伝病ナイミ-ヘン染色体不安定症候群の原因遺伝子の単離

分离导致高度致癌遗传病 Naimi-Hen 染色体不稳定综合征的基因

基本信息

批准号：
09253239
负责人：
松浦伸也
金额：
$ 1.98万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

連鎖解析および機能的試験を用いて、高発癌遺伝病ナイミ-ヘン染色体不安定症候群NBSの原因遺伝子を8q21の一つのYACクローンに同定した。1.種々に欠失したヒト8番染色体をもつマウス融合細胞を作成し、これをドナーにNBS細胞の相補正試験を行った。D8S273からD8S556までの23cMの領域が放射線感受性を相補した。2.ホモ接合体マッピングで、候補領域をD8S273からD8S1822までの7cMの領域に限局した。また、NBS4家系と6例のハプロタイプを分析し、D8S271からD8S270までの1cMの領域にNBS創始者ハプロタイプを同定した。特にD8S1811に強い連鎖不平衡を確認した。3.D8S271からD8S270までの領域をカバーする約4MbのYACコンティグを作成した。4.D8S1811をもつ約1.5MbのYACクローンをスフェロプラスト融合法でNBS細胞に導入した。得られたクローンは放射性抵抗性に変化することが判明し、NBS原因遺伝子を一つのYACクローンに最小化した。このYACクローンには染色体安定化機構に重要な遺伝子が存在することが強く示唆された。現在、このYACクローンのBACコンティグ化を進めており、BACを用いた相補性試験およびその領域の構造解析をおこなうことで、遺伝子同定をめざす予定である。

连锁分析和功能研究用于鉴定高度致癌遗传疾病的病因基因Naimi-Hen染色体不稳定性综合征NBS中的一个8q21的YAC克隆。 1。制备具有各种缺失的人类染色体的小鼠融合细胞，并对NBS细胞的供体进行了相校正测试。从D8S273到D8S556的23厘米区域补充了辐射敏感性。 2。在纯合映射中，候选区域仅限于从D8S273到D8S1822的7cm区域。此外，我们分析了NBS4家族和六个病例的单倍型，并确定了从D8S271到D8S270的1CM区域中NBS创始人的Hplotypes。特别是，在D8S1811中证实了强烈的连锁不平衡。 3。我们创建了一个约4MB的YAC重叠群，覆盖了D8S271至D8S270的区域。 4。使用hashoplast Fusion方法将携带D8S1811的约1.5 MB YAC克隆引入了NBS细胞中。发现所得的克隆被转化为辐射抗性，将引起NBS的基因最小化为单个YAC克隆。强烈建议该YAC克隆包含一个对染色体稳定机制很重要的基因。目前，我们正在努力将这种YAC克隆纳入BAC缔合中，我们计划通过使用BAC和该区域的结构分析进行互补测试来实现基因鉴定。