腎細胞の発癌過程におけるINFα領域の遺伝子欠損の意義

INFα区基因缺失在肾细胞癌变过程中的意义

基本信息

批准号：
07671728
负责人：
舟木賢治
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、腎細胞の発癌過程におけるINFα領域の遺伝子欠損の意義を明らかにするために、INFα領域の遺伝子欠損を示すEkerラット遺伝性腎癌細胞株(ERC)を用いて以下の研究を行った。まず、INFαの遺伝子が種々の癌形質を抑制するか否かを検討するために、INFαの遺伝子領域が存在する正常のヒト第9染色体を微小核融合法によりERCに移入した(A群)。対照として、INFαの遺伝子領域を欠損したヒト第9染色体を同様に移入した(B群)。その結果、A群において分離されたクローンではB群に比べクローニング後早期に死滅するものが多かった。INFαの遺伝子発現については例数を増やして現在検討しているが、これまでの結果からINFα領域の遺伝子欠損が腎細胞の発癌過程に重要な関わりをもつことが示された。一方、Ekerラット遺伝性腎癌の原因遺伝子であるヒト結節性硬化症遺伝子(TSC2)の働きを検討するために、TSC2の存在するヒト16番染色体をERCへ移入した。その結果、ヒト16番染色体移入クローンにおける細胞倍加時間と細胞形態は親細胞(ERC)と同様であった。また、これらのクローンではヒトTSC2遺伝子の特異的な欠失が認められ、さらにRT-RCR解析でもヒトTSC2遺伝子の発現は認められなかった。しかし、染色体移入後のクローンニング以前の細胞ではヒトTSC2遺伝子の発現が認められた。これらの結果から、TSC2遺伝子はEkerラット遺伝性腎癌細胞のin vitroにおける増殖に関わっていることが示され、ヒトTSC2遺伝子はがん抑制遺伝子としての働きをもつことが示唆された。

在这项研究中，使用Eker大鼠遗传性肾脏癌细胞系（ERC）进行了以下研究，该细胞（ERC）在INFα地区表现出基因缺乏，以阐明基因缺乏在肾细胞癌中的肾细胞癌中的重要性。首先，为了研究INFα基因是否抑制各种癌症性状，正常的人类染色体，其中INFα基因区域存在，通过微核融合方法转移到ERC（A组）。作为对照，缺少INFα基因区域的人类染色体也被类似地进口（B组）。结果，在克隆后，A组中分离出的克隆要比B组更早地死亡。我们目前正在检查INFα的基因表达，但病例数量增加，但先前的结果表明，INFα区域的基因缺乏是肾细胞致癌过程中的重要因素。另一方面，为了研究人类结核性硬化基因（TSC2）的功能，该基因负责Eker大鼠的遗传性肾癌，人类染色体16（其中存在TSC2）被转移到ERC中。结果，人类染色体16引入克隆的细胞倍增时间和细胞形态与亲本细胞（ERC）的细胞形态相同。此外，在这些克隆中观察到了人类TSC2基因的特异性缺失，RT-RCR分析未揭示人类TSC2基因的表达。然而，在染色体转移后克隆之前，在细胞中观察到人类TSC2基因的表达。这些结果表明，TSC2基因参与Eker大鼠遗传性肾脏癌细胞的体外增殖，这表明人TSC2基因充当癌症抑制基因。