BUB1Bによる紡錘体チェックポイントと中心体複製の分子連携機構

BUB1B 纺锤体检查点和中心体复制的分子协调机制

基本信息

批准号：
18012034
负责人：
松浦伸也
金额：
$ 6.59万
依托单位：
Hiroshima University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18012034/
关键词：
高発がん性遺伝病染色体チェックポイント細胞周期 BubR1 BUB1B Plk1 中心体

项目摘要

我々は、染色体の数の不安定性を特徴とする高発がん性遺伝病PCS症候群の原因遺伝子として紡錘体チェックポイント遺伝子BUB1Bを同定した。我々は最近、この患者細胞が紡錘体チェックポイント異常に加えて、中心体の過剰複製とこれに引き続く多極性細胞分裂像を高頻度に示している事実を見出した。これらの結果から紡錘体チェックポイントタンパク質BUB1Bが中心体複製をも制御して安定な染色体分配を保証していることが考えられた。本研究はこの知見に基づいてBUB1Bによる紡錘体チェックポイントと中心体複製の分子連係機構の解明を目的としている。免疫染色と中心体精製実験の結果、BubR1は正常細胞の中心体に局在しているが患者細胞(BubR1発現低下細胞)においては、その局在が低下していた。さらにBubR1の内部領域が中心体への局在に必要なことを見いだした。さらにこの領域はPolo- like kinase 1 (Plk1)との結合にも必要なことを明らかにした。患者細胞にBubR1を発現させるとPlk1の活性が低下し、中心体の過剰複製が抑制された。また、患者細胞のPlk1をノックダウンさせても、中心体の過剰複製が抑制された。さらにHeLa細胞にPlk1を単独に過剰発振させると、中心体の過剰複製が劇的に誘導された。以上の結果から、BubR1はM期チェックポイントに加えて、間期のPlkl活性を制御することで中心体の過剰複製を抑制していることが明らかとなった。

我们将纺锤体检查点基因BUB1B鉴定为高度致癌遗传疾病PCS综合征的致病基因，其特征在于染色体数量的不稳定。最近，我们发现该患者细胞经常表现出主轴检查点异常以及过度的中心体复制和随后的多极细胞分裂图像。这些结果表明，主轴检查点蛋白BUB1B还调节中心体复制并确保稳定的染色体分布。基于这一发现，这项研究旨在阐明纺锤体检查点的分子连锁机制和bub1b的中心体复制。由于免疫染色和中心体纯化实验，BUBR1定位于正常细胞的中心体，但其定位降低了患者细胞（BUBR1表达降低的细胞）。此外，我们发现BUBR1的内部区域对于将其定位到中心体是必要的。此外，据揭示了该区域对于与polo样激酶1（PLK1）结合也是必要的。 BUBR1在患者细胞中的表达降低了PLK1的活性，并抑制了中心体过度复制。另外，患者细胞中PLK1的敲低抑制了中心体过度复制。此外，在HeLa细胞中，PLK1单独过度振荡会显着诱导中心体的过度复制。从上述结果中，揭示了BUBR1除了在M相检查点外，还可以通过控制PLKL活性来抑制过度的中心体复制。